Asosiy farq – CFU va MPN
Koloniya hosil qiluvchi birlik (CFU) va eng ko'p ehtimoliy raqam (MPN) namunalardagi mikroorganizmlarni sanashda qo'llaniladigan ikkita usuldir. Ikkala parametr ham suv namunalarida suv sifati va najas ko'rsatkichi bakteriyalarini aniqlash uchun ishlatiladi. Koloniya hosil qiluvchi birlik ma'lum bir namunaning o'ziga xos hajmi yoki og'irligidagi yashovchan bakterial hujayralar yoki qo'ziqorin hujayralari sonini sanash uchun ishlatiladigan o'lchovdir. Ushbu parametr uchun standart birlik CFU/ml yoki CFU/g hisoblanadi. Mumkin bo'lgan raqam suyuqlik namunasidagi hayotiy bakterial hujayralar sonini o'lchash uchun ishlatiladigan boshqa birlikdir. CFU va MPN o'rtasidagi asosiy farq shundaki, CFU qattiq agar plastinkasida o'sadigan bakterial va qo'ziqorin koloniyalaridan, MPN esa suyuq muhitda o'sadigan hayotiy bakteriyalardan hisoblanadi.
CFU nima?
Koloniya hosil qiluvchi birlik (CFU) ma'lum bir namunadagi yashovchan bakterial yoki qo'ziqorin hujayralari sonini o'lchaydigan parametrdir. Koloniya hosil qiluvchi birliklarni hisoblash usuli standart plastinkalar soni deb ataladi. Agar plastinkalarida paydo bo'ladigan hayotga yaroqli koloniyalar suyuqliklar uchun namunaning 1 ml ga (koloniya hosil qiluvchi birlik) CFU yoki qattiq moddalar uchun namunaning 1 g (bir gramm koloniya hosil qiluvchi birlik) uchun CFU sifatida ifodalanadi.
Namunadagi CFUni o'lchash uchun ikkita umumiy usul qo'llaniladi. Ular yoyilgan plastinka usuli va quyma plastinka usuli. Ushbu ikki usul ketma-ket suyultirish deb ataladigan usul bilan qo'llab-quvvatlanadi. Ketma-ket suyultirilgan namunalar agar yuzasida koloniyalarning sonini olish imkonini beradi. Ma'lum hajmdagi namunani agar plastinka yuzasiga yoyish yoki agar bilan aralashtirib, plastinka ustiga quyish mumkin. Keyin plastinka inkubatsiya qilinadi va paydo bo'lgan koloniyalar hisoblanadi. Koloniyalar soni asl namunadagi mikroorganizmlar soniga bog'liq. Juda ko'p koloniyalarni yoki juda oz koloniyalarni ko'rsatadigan plitalar hisobga olinmaydi, chunki natijalar bu plitalarda statistik jihatdan aniq bo'lmasligi mumkin. Statistik ma'lumotlarga ko'ra, eng yaxshi diapazon agar plastinkada 30-300 koloniyadir. Shuning uchun to'g'ri sanab o'tish uchun to'g'ri plitalarni tanlash kerak. Yuqoridagi funksiya uchun ketma-ket suyultirish amalga oshiriladi.
Plitalardagi hayotga yaroqli koloniyalar sonini hisoblagandan so'ng, CFU/ml quyidagi tenglama yordamida hisoblanishi mumkin.
CFU har bir ml original namuna=plastinkadagi koloniyalar soni X suyultirish omili
Suyultirish omili=(1/ Plitaning suyultirilishi)
Masalan, agar siz 10-4 suyultirish plastinkasida 149 ta koloniya olsangiz, u holda 1 ml asl namunadagi bakteriyalar sonini quyidagicha hisoblash mumkin.:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 yoki 1490000
=1. 49 x 106
01-rasm: Koloniyani shakllantirish birligi
MPN nima?
Eng ehtimoliy raqam CFU/ml ga muqobil o'lchovdir. MPN shuningdek, suyuqlik namunasidagi yashovchan hujayralarni ham baholaydi. U suyuq kulturada o'sadigan organizmlarni hisoblaydi va asosan bakteriologik usuldir. Bu usul, ayniqsa, bakterial hujayralarning past konsentratsiyasini o'z ichiga olgan namunalar uchun foydalidir; masalan, sut, ichimlik suvi va boshqalar. MPN qiymati 100 ml hajm uchun ifodalanadi. MPN ehtimollik nazariyasiga asoslangan statistik usulga tayanadi. 100 ml namuna uchun MPN qiymatlarini topish uchun mo'ljallangan statistik jadvallar mavjud. Bu jadvallarda natijalar 95% ishonch chegarasida koʻrsatilgan.
MPN qiymati bir nechta naychali fermentatsiya usuli deb ataladigan texnikani amalga oshirgandan so'ng hisoblanadi. Tegishli madaniyat muhitini o'z ichiga olgan uchta naycha to'plami 10 ml, 1 ml va 0 kabi uch xil hajmdagi namunalar bilan emlanadi.1 ml va o'sish uchun inkubatsiya qilinadi. Kuluçka davridan keyin o'sish mavjudligi yoki yo'qligi uchun naychalar + (ijobiy) yoki - (salbiy) ball bilan baholanadi. Keyin mikroorganizmlar sonini baholash uchun ijobiy va salbiy natijalar namunasi MPN statistik ehtimollik jadvali bilan solishtiriladi. Keyin 100 ml namuna uchun MPN qiymati beriladi. MPN suv namunalarida mavjud bo'lgan koliform bakteriyalarni aniqlash uchun keng qo'llaniladi.
02-rasm: MPN jadvali
CFU va MPN o'rtasidagi farq nima?
CFU va MPN |
|
| CFU - berilgan namunadagi yashovchan bakterial yoki zamburugʻli koloniyalar sonini ifodalash uchun ishlatiladigan oʻlchov. | MPN CFUga muqobil oʻlchovdir va suyuqlik namunasidagi yashovchan bakterial hujayralar sonini oʻlchaydi. |
| Birlik | |
| CFU/ml yoki CFU/g | MPN/100 ml |
| Hisoblash | |
| CFU agar plastinkalarida oʻstirilgan koloniyalar sonini hisoblash yoʻli bilan hisoblanadi. | MPN quvurlarning ijobiy va manfiy namunalarini MPN statistik jadvali bilan solishtirish orqali hisoblanadi. |
| Serial suyultirish texnikasi | |
| Serial suyultirish namunalarni agar plastinkalariga joylashtirishdan oldin amalga oshiriladi. | MPN hisoblanganda ketma-ket suyultirish odatda bajarilmaydi |
| Usullar | |
| Spread plastinka usuli va quyma plastinka usuli CFU olish uchun bajariladigan ikki xil usuldir. | Bir nechta naychali fermentatsiya MPN qiymatini olish uchun amalga oshiriladigan usuldir. |
Xulosa – CFU va MPN
Mikroblarning o'sishini o'lchash ko'p sabablarga ko'ra talab qilinadi. Oziq-ovqat mahsulotlarini qayta ishlash korxonalarida oziq-ovqat tarkibidagi mikroorganizmlar darajasini va turini o'lchash kerak. Oziq-ovqat sanoati va tibbiyotda sterilizatsiya muolajalarini samarali qo'llashni ta'minlash kerak. Kanalizatsiya tozalash inshootlarida mikroblarni muntazam ravishda hisoblash talab qilinadi. Molekulyar biologiyada protsedurani optimallashtirishda plitalardagi koloniyalar sonini o'lchash kerak. Shunday qilib, turli xil ro'yxatga olish va o'sishni o'lchash usullari mavjud. CFU va MPN - bu turli sohalarda keng qo'llaniladigan ikkita usul. CFU ma'lum bir namunada mavjud bo'lgan yashovchan bakterial va qo'ziqorin koloniyalari sonining o'lchovidir. Standart plastinka hisoblash usuli yoki yashovchan plastinka hisoblash usuli yordamida hisoblanadi. MPN suyuqlik namunasining ma'lum hajmida mavjud bo'lgan bakterial hujayralar sonini ifodalovchi yana bir o'lchovdir. Ko'p naychali fermentatsiya usuli va MPN jadvali yordamida hisoblab chiqiladi. Bu CFU va MPN o'rtasidagi farq.
CFU va MPNning PDF versiyasini yuklab oling
Siz ushbu maqolaning PDF-versiyasini yuklab olishingiz va iqtibos keltirgan holda oflayn maqsadlarda foydalanishingiz mumkin. Iltimos, PDF versiyasini bu yerdan yuklab oling CFU va MPN o'rtasidagi farq.
