Elisa va Elispot oʻrtasidagi asosiy farq shundaki, Elisa fermentga bogʻlangan immunosorbent tahlil boʻlib, ajratilgan signalizatsiya oqsillarining umumiy kontsentratsiyasini aniqlaydi, Elispot esa ferment bilan bogʻlangan immunosorbent tahlil boʻlib, individual sitokin ajratuvchi hujayralarni aniqlaydi.
Elisa va Elispot - bu tibbiyot, o'simlik patologiyasi, biotexnologiya va turli farmatsevtika sohalarida keng qo'llaniladigan ikkita fermentga bog'liq immunosorbent tahlillari. Ushbu usullarda protein tahlili unga qarshi qaratilgan antikor tomonidan aniqlanadi. Elisa laboratoriyalarda ishlatiladigan eng mashhur fermentga bog'liq immunosorbent tahlilidir. Boshqa tomondan, Elispot - bu Elisa o'rniga ishlatilmaydigan, balki laboratoriyalarda Elisaga qo'shimcha ravishda qo'llaniladigan fermentga bog'liq immunosorbent tahlilidir.
Elisa Assay nima?
Elisa fermentga bogʻlangan immunosorbent tahlil boʻlib, ajratilgan signalizatsiya oqsillarining umumiy kontsentratsiyasini aniqlaydi. Bu keng qo'llaniladigan analitik biokimyoviy tahlil bo'lib, u birinchi marta 1971 yilda Engvall va Perlmann tomonidan tasvirlangan. Bu usul suyuqlik namunasida ma'lum protein mavjudligini aniqlash uchun ushbu maxsus proteinga qarshi qaratilgan antikorlar yordamida aniq fazali ferment immunoassaydan foydalanadi. Bu tahlil tibbiyot, oʻsimliklar patologiyasi va biotexnologiyada keng qoʻllaniladigan diagnostika vositasidir.
ELISA testining mexanizmi
Elishay testining aksariyatida noma'lum miqdordagi antigen boshida qattiq tayanchga (mikrolitr plastinka) immobilizatsiya qilinadi. Keyin mos keladigan asosiy antikor qattiq qo'llab-quvvatlash yuzasiga qo'llaniladi. Bu antikor antigen (antigen-antikor kompleksi) bilan kompleks hosil qiladi. Antigen bilan bog'langan birlamchi antikor biokonjugatsiya orqali ferment bilan bog'langan ikkilamchi antikor tomonidan aniqlanishi mumkin. Eliza testining yakuniy bosqichida fermentning substratini o'z ichiga olgan modda qo'shiladi. Agar birlamchi antikorning antijen bilan to'g'ri bog'lanishi bo'lsa, substrat tomonidan aniqlanadigan rang o'zgarishi hosil bo'ladi. Oxir-oqibat, bu namunadagi antigen miqdorini aniqlaydi.
01-rasm: Elizaning har xil turlari
Bundan tashqari, Elizaga to'g'ridan-to'g'ri Elisa va bilvosita Elisa kabi turli xil yondashuvlar mavjud. Hozirda turli xil Elisa testlari odam sili Mycobacterium tuberculosis, rotavirus, gepatit B virusi, gepatit C virusi, enterotoksin ishlab chiqaruvchi E.coli, OIV va SARS-CoV-2 kabi patogenlarni aniqlash uchun qo'llaniladi.
Elispot tahlili nima?
Elispot fermentga bog'langan immunosorbent tahlil bo'lib, individual sitokin ajraladigan hujayralarni aniqlaydi. Sesil Czerkinskiy birinchi marta 1983 yilda ELISpotni tasvirlab bergan. Bu bitta hujayra uchun sitokin sekretsiyasi chastotasini miqdoriy o'lchashga qaratilgan tahlilning bir turi. Shuningdek, u biologik yoki kimyoviy protein tahlilini aniqlash uchun antikorlardan foydalanadigan usul sifatida tasniflanadi. Fluorospot tahlili Elispot tahlilining o'zgarishi bo'lib, u bir nechta tahlil qiluvchi moddalarni (ko'proq maxfiy oqsillarni) tahlil qilish uchun floresandan foydalanadi.
Elispot testi mexanizmi
Bu mexanizmda dastlab mikrolitrli plastinkalar quduqlariga sitokinga xos monoklonal antikorlar qo'shiladi. Keyin kuzatilayotgan kerakli hujayralar quduqlarga qo'shiladi. Keyinchalik hujayralar inkubatsiya qilinadi. Hujayra inkubatsiyasi vaqtida hujayralar har qanday stimulga reaksiyaga kirishishi va sitokinni ajratishi mumkin. Inkubatsiya qilingan hujayralar tomonidan ajratilgan sitokinlar antikorlarga biriktiriladi, chunki hujayralar sitokinga xos monoklonal antikorlar bilan o'ralgan.
02-rasm: Elispot tahlili
Ushbu sitokinga xos monoklonal antikorlarni aniqlash uchun quduqqa biotinlangan maxsus aniqlovchi antikorlar qo'shiladi. Biotinlangan maxsus aniqlovchi antikorlar quduqlardagi sitokinga xos monoklonal antikorlarni ushlaydi. Bundan tashqari, aniqlovchi antikorlar bilan bog'lanish uchun quduqlarga streptavidin-ferment konjugatlari qo'shiladi. Oxirgi bosqichda quduqlarga maxsus substratlar qo'shiladi. Ferment konjugatlari va substratlarning reaktsiyalari quduqlarda aniq dog'larni hosil qiladi. Bu aniq nuqtalar avtomatlashtirilgan ELISpot o'quvchida o'qiladi. Oxir oqibat, bu sitokin sekretsiyasi chastotasini qo'shimcha hisoblab chiqadi.
Elisa va Elispot oʻrtasidagi oʻxshashliklar qanday?
- Ularning ikkalasi ham ferment bilan bogʻliq immunosorbent tahlillari.
- Ikkala tahlil maxsus oqsil tahlillarini aniqlaydi.
- Ushbu tahlillar oqsil tahlilchilarini aniqlash uchun maxsus antikorlardan foydalanadi.
- Ikkala tahlil fermentlar va substratlardan foydalanadi.
- Ular tibbiy laboratoriyalarda diagnostika vositasi sifatida ishlatiladi.
Elisa va Elispot oʻrtasidagi farq nima?
Elisa fermentga bogʻlangan immunosorbent tahlil boʻlib, ajratilgan signalizatsiya oqsillarining umumiy kontsentratsiyasini aniqlaydi. Boshqa tomondan, Elispot fermentga bog'langan immunosorbent tahlil bo'lib, individual sitokinlarni ajratuvchi hujayralarni o'lchaydi. Demak, bu Elisa va Elispot o'rtasidagi asosiy farq. Bundan tashqari, Elisa testida antigen birinchi navbatda mikrolitrli quduqlarga immobilizatsiya qilinadi. Bundan farqli o'laroq, Elispot testida antikor birinchi navbatda mikrolitr quduqlariga immobilizatsiya qilinadi. Shunday qilib, bu Elisa va Elispot o'rtasidagi yana bir farq.
Quyidagi infografikada Elisa va Elispot oʻrtasidagi farqning batafsil tahlili jadval koʻrinishida keltirilgan.
Xulosa – Elisa va Elispot
Elisa va Elispot - bu tibbiyot, o'simliklar patologiyasi, biotexnologiya va turli farmatsevtika sohalarida keng qo'llaniladigan ikkita ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlillari. Elisa o'lchanadigan ligandga qarshi qaratilgan antikorlar yordamida suyuqlik namunasida ligand (oqsil) mavjudligini aniqlaydi. Elispot tahlili immunitet reaktsiyalarini kuzatish uchun keng qo'llaniladigan usuldir. Antikorlar yordamida alohida sitokin ajratuvchi hujayralarni aniqlaydi. Bu ham immunoassay, ham bioassay texnikasi. Shunday qilib, bu Elisa va Elispot o'rtasidagi farqning qisqacha mazmuni.
