Asosiy farq – RNASE A va RNASE H
Ribonukleazalar RNKni kichikroq birliklarga ajratadigan nukleazalardir. Ularni ikki toifaga bo'lish mumkin; endoribonukleazlar va ekzoribonukleazlar. Endoribonukleaza bir yoki ikki zanjirli RNKni parchalashi mumkin bo'lgan endonukleazadir. U RNK polinukleotid zanjiridagi fosfodiester bog'larini ajratadi. Bunga misollar RNase A, RNase III, RNase T1, RNase P va RNase H. Ekzoribonukleaza bu RNK molekulasining 5 yoki 3 uchidan terminal nukleotidlarni olib tashlash orqali RNKni buzadigan ekzonukleaza. Misollar RNase R, RNase II, RNase D va RNase PH. RNASE A va RNASE H o'rtasidagi asosiy farq shundaki, RNase A pankreatik ribonukleaza bo'lib, u bir ipli RNKni kichikroq qismlarga ajratadi, RNase H esa RNK-DNK gibrididagi RNKni kichikroq birliklarga ajratadigan o'ziga xos bo'lmagan fermentdir. gidrolitik mexanizm.
RNASE A nima?
RNaz A - bu bir zanjirli RNKning 3' uchidagi juftlanmagan sitozin va urasil qoldiqlarini maxsus ajratuvchi pankreatik ribonukleaza. RNase H yuqori tuz konsentratsiyasida ishlaydi (0,3M yoki undan yuqori NaCl konsentratsiyasi). Gidrolitik reaksiya ikki bosqichdan iborat. U 2', 3' siklik monofosfat oraliq mahsuloti orqali 3' fosforlangan mahsulot hosil qiladi. U yuqori tuz konsentratsiyasida bir zanjirli RNKga xos bo'lsa-da, u RNK-DNK gibrididagi ikki zanjirli RNK va RNKni ham pastroq NaCl konsentratsiyasida (0,3M NaCl dan past) parchalashi mumkin.
Bryus Merrifild birinchi marta bu fermentni sintez qilgan. RNase A molekulyar tadqiqotlarda juda mashhur fermentdir. Sigir me'da osti bezi RNase A RNase A ga misoldir. Va u laboratoriyada ishlatiladigan eng qattiq fermentlardan biridir. Bu ferment o'z faoliyati uchun kofaktorga muhtoj emas. Bu yuqori termostabil fermentdir. RNase A to'g'ri aminokislotalar ketma-ketligi aniqlangan birinchi ferment va uchinchi proteindir. Bu ferment juda kichik, 124 aminokislota va molekulyar massasi 12600da. Unda to'rtta Histidin qoldig'i mavjud (Uning 12 va Uning 119 katalitik reaksiyaga kirishadi).
01-rasm: RNaz A
RNase A ni xom namunani qaynatish orqali ajratib olish mumkin. Qaynatganda qolgan barcha fermentlar RNase A qoldiqlarini parchalaydi. RNase A hayratlanarli darajada barqaror fermentdir. Bu ferment ribonukleaza inhibitori oqsili, og‘ir metallar va uridin vanadat komplekslarini inhibe qiladi.
RNase H nima?
RNase H - bu o'ziga xos bo'lmagan ribonukleaza fermenti bo'lib, u RNK-DNK gibrididagi RNKni gidrolitik reaksiya orqali parchalashi mumkin. RNase H RNK-DNK gibrididagi RNKning 3'- O-P bog'lanishini ajratadi. Oxir-oqibat, u 3'OH va 5' fosfat bilan yakunlangan mahsulotlarni ishlab chiqaradi. DNK replikatsiyasida u yangi DNK zanjirlari hosil bo'lgandan keyin RNK primerini olib tashlash orqali hal qiluvchi rol o'ynaydi. Laboratoriya sharoitida u RNK-DNK gibridida RNK ni ayniqsa buzadi, lekin DNK va gibridlanmagan RNK emas. Va bu ferment odatda cDNK sintezi jarayonida birinchi qo'shimcha DNK zanjiri hosil bo'lgandan keyin RNK shablonini yo'q qilish uchun ishlatiladi.
02-rasm: RNase H
RNase H nukleaz himoyasi tahlillarida ham qo'llaniladi. Bundan tashqari, mRNK dan poli A dumini olib tashlash uchun ham qo'shilishi mumkin. RNase H hujayra ichidagi va tashqarisidagi kodlanmaydigan RNKni yo'q qilish qobiliyatiga ega. Metall ionlari bu protein faolligi uchun kofaktor sifatida talab qilinadi. Xelator (EDTA) RNase H fermentini inhibe qilish uchun ishlatilishi mumkin.
RNASE A va RNASE H o'rtasidagi o'xshashliklar qanday?
- Ikkalasi ham tabiatan oqsildir.
- Ikkalasi ham endoribonukleaz
- Ikkalasi ham RNKni buzishi mumkin.
- Ikkalasi ham gidrolitik reaksiyalarni amalga oshiradi.
- Molekulyar laboratoriyalar ikkalasidan ham foydalanadi.
RNASE A va RNASE H o'rtasidagi farq nima?
RNASE A va RNASE H |
|
| RNase A - bu me'da osti bezi ribonukleazasi boʻlib, u yuqori tuz konsentratsiyasida bir zanjirli RNKning juftlanmagan sitozin va urasil qoldiqlarining 3' uchini maxsus ajratadi. | RNase H nospesifik ribonukleaza fermenti boʻlib, u RNK-DNK gibrididagi RNKni gidrolitik reaksiya orqali parchalashi mumkin. |
| RNK parchalanishining tabiati | |
| RNase A yuqori tuz konsentratsiyasida bir zanjirli RNKni maxsus ajratadi. | RNaz H RNK-DNK gibrididagi RNKni ajratadi. |
| Faoliyat uchun kofaktorlarga ehtiyoj | |
| RNase A faoliyati uchun kofaktorlarga muhtoj emas. | RNase H faolligi uchun kofaktor sifatida metall ionlariga muhtoj. |
| Protein faolligining inhibitorlari | |
| Ribonukleaza inhibitori oqsili, og'ir metallar va uridin vanadat komplekslari RNKaz A faolligini inhibe qiladi. | Xelator (EDTA) RNase H faolligini inhibe qiladi. |
| DNK replikatsiyasida RNK primerini olib tashlash | |
| RNase A DNK replikatsiyasida RNK primerini olib tashlash uchun ishlatilmaydi. | RNase H DNK replikatsiyasida RNK primerini olib tashlash uchun ishlatiladi |
| Komplementar DNK (C-DNK) sintezida DNK shablonini olib tashlash | |
| RNase A komplementar DNK (C-DNK) sintezi vaqtida RNK shablonini olib tashlash uchun ishlatilmaydi. | RNase H komplementar DNK (C-DNK) sintezi vaqtida RNK shablonini olib tashlash uchun ishlatiladi. |
| Oligo (dt) ga gibridlangan mRNKdagi poli-A-dumni olib tashlash | |
| RNase A oligo (dt) ga gibridlangan mRNKdagi "poli-A dumini" olib tashlash uchun ishlatilmaydi. | RNase H oligo (dt) ga gibridlangan mRNKdagi "poli-A dumini" olib tashlash uchun ishlatiladi |
Xulosa – RNASE A va RNASE H
Ribonukleazalar RNKni kichikroq birliklarga ajratish qobiliyatiga ega nukleaza fermentlaridir. Ular ikki xil; endoribonukleazlar va ekzoribonukleazlar. Endoribonukleaza - bu bir yoki ikki zanjirli RNKni parchalash qobiliyatiga ega bo'lgan endonukleaza. Va u RNK polinukleotid zanjiridagi fosfodiester bog'lanishini ajratadi. RNase A va RNase H ikkita endoribonukleazdir. RNase A - bu oshqozon osti bezi ribonukleazasi bo'lib, u yuqori tuz konsentratsiyasida bir zanjirli RNKning 3 'uchida juftlashtirilmagan sitozin va urasil qoldiqlarini maxsus ajratadi. RNase H - bu RNK-DNK gibrididagi RNKni gidrolitik reaktsiya orqali parchalashi mumkin bo'lgan nonspesifik ribonukleaza fermenti. Bu RNase A va RNase H o'rtasidagi farq.
RNASE A va RNASE H PDF formatini yuklab oling
Siz ushbu maqolaning PDF-versiyasini yuklab olishingiz va iqtibos keltirgan holda oflayn maqsadlarda foydalanishingiz mumkin. Iltimos, PDF versiyasini bu yerdan yuklab oling RNASE A va RNASE o'rtasidagi farq H
