Gel filtrlash va yaqinlik xromatografiyasi o'rtasidagi asosiy farq shundaki, gel filtrlash xromatografiyasi tahlil qilinadigan moddaning molekulyar og'irligi yoki hajmidagi farqlarga bog'liq, yaqinlik xromatografiyasi esa analitning immobilizatsiyalangan ligandga yaqinligiga bog'liq.
Analitik kimyoda xromatografiya atamasi aralashmaning tarkibiy qismlarini turli usullar yordamida ajratish jarayonini bildiradi. Xromatografiya - bu ajratishning turli xil usullarini ifodalovchi umumiy nom.
Gel filtrlash xromatografiyasi nima?
Gel filtrlash xromatografiyasi analitik usul bo'lib, unda tarkibiy qismlarni ajratish molekulyar og'irlik yoki o'lchamdagi farqga bog'liq. Ushbu usul, shuningdek, o'lchamni istisno qilish xromatografiyasi yoki molekulyar elak xromatografiyasi sifatida ham tanilgan. Bu jarayonda ajratish texnikasi namunadagi molekulalarning gel-filtrlash muhitining teshiklariga kirish qobiliyatiga bog'liq.
Jel filtrlash texnikasida statsionar faza tor oʻlchamdagi molekulyar oʻlchamdagi teshiklarga ega boʻlgan gidratlangan, shimgichga oʻxshash materialdan iborat boncuklardan iborat. Agar biz turli o'lchamdagi molekulalardan tashkil topgan suvli eritmani ushbu "molekulyar elaklar" ni o'z ichiga olgan ustun orqali o'tkazsak, filtrlash muhitining teshiklaridan kattaroq bo'lgan molekulalar kolonna bo'ylab tez harakatlanadi. Bundan farqli o'laroq, kichikroq molekulalar jelning teshiklariga kiradi va ustun bo'ylab asta-sekin harakat qiladi. Molekulalar molekulyar hajmini kamaytirish tartibida ustundan elutsiya qilinadi. Bu erda jelni istisno qilish chegarasi ma'lum bir jelning teshiklariga kira olmaydigan eng kichik molekulalarning molekulyar massasidir.
Bevosita gel filtrlash usuli, barqaror holatdagi gel filtratsiyasi, jel boncuk dializi va boshqalar kabi jel filtrlash usullarining har xil turlari mavjud. Bilvosita gel filtrlash xromatografiyasi qalqonsimon bezning erkin gormonlarini aniqlashda foydalidir. Barqaror holatdagi gel filtrlash xromatografiyasi asosan kortizol, testosteron va boshqalar kabi erkin steroidlarni o'lchash uchun foydali bo'lgan bilvosita texnikadir. Boshqa tomondan, jel boncuk dializi, barqaror holatdagi gel filtratsiyasining nisbatan soddalashtirilgan modifikatsiyasidir.
Yaqinlik xromatografiyasi nima?
Yaqinlik xromatografiyasi immobilizatsiyalangan ligand va uning bogʻlovchi sherigi oʻrtasidagi oʻziga xos bogʻlanish taʼsiriga bogʻliq boʻlgan analitik texnika va ajratish usulidir. Ba'zi misollar orasida antikor-antigen bog'lanishi, ferment-substrat bog'lanishi va ferment-ingibitor bog'lanishi kiradi. Shuning uchun bu usul nuklein kislotalarni tozalashda, hujayra ekstraktlaridan oqsillarni tozalashda va qondan tozalashda juda muhim ilovalarga ega.
Ushbu texnikada eng muhim xususiyat ligandlarni immobilizatsiya qilishdir. Buning uchun akrilatlar va silika jeli kabi turli xil materiallardan foydalanishimiz mumkin. Nishon molekulaning ligandga sterik aralashuvini oldini olish muhimdir. Bundan tashqari, qattiq fazaga inhibitor biriktirilgan. Biz bu inhibitorni spacer deb ataymiz. Klassik tarzda ajratgich uglevodorod zanjiridan iborat.
Yaqinlik xromatografiyasining statsionar bosqichi yadro, spacer va ligandni o'z ichiga oladi. Ba'zida u ligand bilan bog'langan metall ioniga ham ega. Ushbu texnikada statsionar faza uchun eng ko'p afzal qilingan qattiq faza agaroz jeldir, chunki u ustunni har qanday o'lchamdagi qatron qatlamlari bilan to'ldirish va qadoqlash uchun osonlik bilan tarqatiladi va biomolekulalar boncuklar ichiga va boncuklar orqali erkin oqishi uchun etarlicha katta. Ligandlar boncuk polimeriga turli yo'llar bilan kovalent biriktirilishi mumkin. Eng keng tarqalgan ajratuvchi birikmalar siyanogen bromid, epoksid, C6 kislotali epoksid va diamindir. Boshqa tomondan, biz ishlatishimiz mumkin bo'lgan ligand maqsadga qarab farqlanadi, masalan, antikor-antigen, temir yoki alyuminiy ionlari-fosfoproteinlar, avidin-biotin, glutation-GST, chelator-His-belgilangan oqsillar va boshqalar.
Gel filtrlash va yaqinlik xromatografiyasi oʻrtasidagi farq nima?
Xromatografiya muhim analitik texnikadir. Jel filtrlash xromatografiyasi va yaqinlik xromatografiyasi xromatografiyaning ikkita muhim variantidir. Jel filtratsiyasi va yaqinlik xromatografiyasi o'rtasidagi asosiy farq shundaki, gel filtrlash xromatografiyasi analit namunasining molekulyar og'irligi yoki hajmidagi farqlarga bog'liq, yaqinlik xromatografiyasi esa analitning immobilizatsiyalangan ligandga yaqinligiga bog'liq.
Xulosa – Gel filtrlash va yaqinlik xromatografiyasi
Xromatografik usullarning qoʻllanilishi va tahlil qilinadigan namunaning tabiatiga koʻra har xil turlari mavjud. Jel filtrlash va yaqinlik xromatografiyasi - bu ikkita usul. Jel filtrlash va yaqinlik xromatografiyasi o'rtasidagi asosiy farq shundaki, gel filtrlash xromatografiyasi analit namunasining molekulyar og'irligi yoki hajmidagi farqlarga bog'liq, yaqinlik xromatografiyasi esa analitning immobilizatsiyalangan ligandga yaqinligiga bog'liq.
