Yaqinlik va ion almashinish xromatografiyasi oʻrtasidagi asosiy farq shundaki, biz aralashmadagi zaryadlangan yoki zaryadlanmagan komponentlarni ajratish uchun yaqinlik xromatografiyasidan, aralashmadagi zaryadlangan komponentlarni ajratish uchun esa ion almashinish xromatografiyasidan foydalanishimiz mumkin.
Xromatografiya - bu aralashmadagi kerakli komponentlarni ajratish uchun foydalanishimiz mumkin bo'lgan usul. Suyuqlik xromatografiyasi, gaz xromatografiyasi va boshqalar kabi turli xil turlari mavjud. Yaqinlik xromatografiyasi va ion almashinish xromatografiyasi suyuq xromatografiyaning ikkita kichik toifasidir. Bundan tashqari, ushbu texnikada ikki bosqich mavjud. Ya'ni, ular statsionar faza va mobil fazadir. Ushbu usullarning maqsadi komponentlarning bog'lanishiga qarab, harakatlanuvchi fazadagi komponentlarni statsionar faza yuzasiga ajratishdir.
Yaqinlik xromatografiyasi nima?
Yaqinlik xromatografiyasi biokimyoviy usul boʻlib, biz aralashmadagi komponentlarni ushbu komponentlar orasidagi oʻzaro taʼsirga qarab ajratish uchun foydalanamiz.
Bu holatda biz foydalanadigan oʻzaro taʼsirlar quyidagilarni oʻz ichiga oladi:
- Antigen-antikor oʻzaro taʼsiri
- Ferment-substrat oʻzaro taʼsiri
- Retseptor-ligand oʻzaro taʼsiri
- Protein-nuklein kislotalarning oʻzaro taʼsiri
Ushbu texnikada biz ushbu ajratish texnikasi uchun molekulalarning molekulyar xususiyatlaridan foydalanamiz. Bu erda biz kerakli birikmaning vodorod bog'lanishi, ion ta'siri, disulfid ko'prigi, hidrofobik o'zaro ta'sir va boshqalar orqali statsionar faza bilan o'zaro ta'sir qilishiga imkon beramiz. Statsionar faza bilan o'zaro ta'sir qilmaydigan molekulalar birinchi navbatda elute bo'ladi. Shunday qilib, biz uni aralashmadan ajratishimiz mumkin. Kerakli birikma statsionar fazaga biriktirilgan holda qoladi. Shuning uchun, biz uni elutiv erituvchi yordamida ajratib olishimiz va uni ajratish uchun ham elut qilishimiz mumkin.
01-rasm: Xromatografik ustun
Affinlik xromatografiyasi bufer eritmasi yordamida aralashmadan moddani tozalash va konsentratsiyalashda foydalidir. Bundan tashqari, aralashmadagi kiruvchi moddalarni kamaytirishga yordam beradi. Ushbu jarayon uchun foydalanadigan apparatni ko'rib chiqayotganda, biz statsionar fazamiz bilan to'ldirilgan ustunni ishlatishimiz kerak. Keyin, biz ajratmoqchi bo'lgan biomolekulalarni o'z ichiga olgan mobil fazani yuklashimiz kerak. Keyinchalik, ularni statsionar faza bilan bog'lashga ruxsat bering. Shundan so'ng, yuvish buferi yordamida biz maqsadli bo'lmagan biomolekulalarni ajratishimiz mumkin, ammo ajratish jarayoni muvaffaqiyatli bo'lishi uchun maqsadli molekulalar statsionar fazaga yuqori yaqinlikka ega bo'lishi kerak.
Ion almashinuvi xromatografiyasi nima?
Ion xromatografiyasi suyuq xromatografiyaning bir turi bo'lib, unda biz ion moddalarni tahlil qilishimiz mumkin. Ko'pincha biz noorganik anionlar va kationlarni (masalan, xlorid va nitrat anionlari va kaliy, natriy kationlarini) tahlil qilish uchun foydalanamiz. U kamroq tarqalgan bo'lsa-da, biz organik ionlarni ham tahlil qilishimiz mumkin. Bundan tashqari, biz oqsillarni tozalash uchun ushbu texnikadan foydalanishimiz mumkin, chunki oqsillar ma'lum pH qiymatlarida zaryadlangan molekulalardir. Bu erda biz zaryadlangan zarralar biriktirilishi mumkin bo'lgan qattiq statsionar fazadan foydalanamiz. Masalan, qattiq tayanch sifatida biz qatron polistirol-divinilbenzol sopolimerlaridan foydalanishimiz mumkin.
02-rasm: Ion almashinuvi xromatografiyasining fazalari
Buni yanada tushuntirish uchun statsionar fazada sulfat anionlari yoki toʻrtlamchi amin kationlari kabi oʻzgarmas ionlar mavjud. Agar biz ushbu tizimning betarafligini saqlamoqchi bo'lsak, ularning har biri qarshi ion (qarama-qarshi zaryadli ion) bilan bog'lanishi kerak. Bu erda, agar qarama-qarshi ion kation bo'lsa, biz tizimni kation almashinadigan smola deb nomlaymiz. Ammo, agar qarshi ion anion bo'lsa, tizim anion almashinadigan smoladir.
Ion almashinuvi jarayonida beshta asosiy faza mavjud;
- Dastlabki bosqich
- Maqsadning adsorbsiyasi
- Elutsiya boshlanishi
- Elutsiya tugaydi
- Regeneratsiya
Yaqinlik va ion almashinish xromatografiyasi oʻrtasidagi farq nima?
Affinlik xromatografiyasi biokimyoviy usul bo'lib, biz aralashmadagi komponentlarni ushbu komponentlar orasidagi o'zaro ta'sirga qarab ajratish uchun foydalanamiz, ion xromatografiyasi esa ion moddalarni tahlil qilishimiz mumkin bo'lgan suyuq xromatografiya shaklidir. Shuning uchun, yaqinlik va ion almashinadigan xromatografiya o'rtasidagi asosiy farq shundaki, biz ion almashinadigan xromatografiyadan faqat ion moddalarni ajratish uchun foydalanishimiz mumkin, yaqinlik xromatografiyasi esa zaryadlangan va zaryadsiz zarralarni ajratishga qodir. Ishlash printsipini ko'rib chiqayotganda, yaqinlik va ion almashinadigan xromatografiya o'rtasidagi farq shundaki, yaqinlik xromatografiyasi maqsadli molekulalarning statsionar fazaga yuqori yaqinlikka ega bo'lganligi sababli davom etadi. Biroq, ion almashinuvi xromatografiyasi uchun maqsadli molekulalar statsionar faza yuzasi zaryadiga qarama-qarshi zaryadga ega.
Quyidagi infografikada yonma-yon taqqoslash sifatida yaqinlik va ion almashinish xromatografiyasi oʻrtasidagi farq koʻrsatilgan.
Xulosa – Ion almashinuvi xromatografiyasiga nisbatan yaqinlik
Xulosa qilib aytganda, yaqinlik va ion almashinish xromatografiyasi suyuq xromatografik texnikaning ikki shaklidir. Yaqinlik va ion almashinish xromatografiyasi o'rtasidagi asosiy farq shundaki, biz aralashmadagi zaryadlangan yoki zaryadsiz komponentlarni ajratish uchun yaqinlik xromatografiyasidan foydalanishimiz mumkin, biz aralashmadagi zaryadlangan komponentlarni ajratish uchun ion almashish xromatografiyasidan foydalanishimiz mumkin.
