Mikronukleus va kometa tahlili oʻrtasidagi asosiy farq shundaki, mikroyadro tahlili mutagen taʼsiri natijasida xromosoma shikastlanishini tekshirish uchun muhim, kometa tahlili esa alohida hujayralardagi birlamchi DNK shikastlanishini aniqlash uchun muhimdir.
Genotoksisite tahlillari mutatsiyalar va xromosoma anomaliyalari imkoniyatlarini baholashga yordam beradi. Genotoksinlarga kimyoviy moddalar va radiatsiya kiradi. Kanserogenlar, mutagenlar va teratogenlar genotoksinlarning asosiy toifalaridir. Ular nuqta mutatsiyalari, deletsiyalar, bitta va ikki zanjirli uzilishlar, xromosoma aberatsiyasi, mikroyadro shakllanishi, DNKni tiklash va hujayra siklining o'zaro ta'siri kabi turli xil zararlarni keltirib chiqaradi. Bunday sharoitlar turli xil kasalliklarga olib kelishi mumkin va genotoksiklik tahlillari ushbu sharoitlardan mumkin bo'lgan zararni oldini oladi. Mikronukleus tahlili va kometa tahlili genotoksiklik tahlillari ostidagi ikkita usuldir.
Mikronukleus tahlili nima?
Mikronukleus tahlili mutagen ta'siri natijasida xromosoma shikastlanishini baholash uchun tahlil. Shpindel hosil bo'lishiga va mikroyadrolarga olib keladigan kimyoviy moddalarni tekshirishda muhim ahamiyatga ega. Mikronukleus tahlili xromosoma tuzilishi va funktsiyasiga aralashganda kimyoviy moddalarning barqarorligi haqida ma'lumot beradi. Ko'pgina kanserogenlar mikronukleus tahlillarida ijobiy natija beradi. Tahlil jarayoni kimyoviy ishlov berish va mikroyadroli hujayralar chastotasini o'lchashni o'z ichiga oladi. Agar mikroyadro hujayralari sonining anormal o'sishi bo'lsa, kimyoviy xromosoma shikastlanishini keltirib chiqaradi degan xulosaga keladi.
Mikronukleus tahlili odatda faol boʻlinuvchi hujayralarda oʻtkaziladi. Shuning uchun hujayra bo'linishi natijasida hosil bo'lgan eritrotsitlar va suyak iligi ildiz hujayralari bunday tahlillar uchun ideal nomzoddir. Ular doimiy va tez aylanmani boshdan kechiradilar. Eritrotsitlarning haqiqiy yadrolari bo'lmagani uchun tahlil oxirida mikroyadroli hujayralar ko'proq ko'rinadi.
01-rasm: Mikroyadro tahlilini kuzatish
Mikronukleus tahlillari tejamkor, tezroq, qulay va amalga oshirish uchun kamroq malaka talab qiladi. Ular xromosoma aberatsiyasini ishonchli tarzda tez aks ettiradi va xromosoma shikastlanishlarini tezda baholash uchun juda foydali. Mikronukleus tahlilining maxsus va ko'p qirrali turi sitokinez blokli mikronukleus sitom (CBMNcyt) tahlilidir. Hujayralarda xromosoma shikastlanishi va beqarorligini o'lchash uchun afzalroq tahlil hisoblanadi. Biroq, mikronukleus tahlilini qo'llashning asosiy muammosi shundaki, u turli xil xromosoma aberratsiyalarini aniqlay olmaydi va tahlil mitotik tezlik va hujayra o'limi nisbatiga ta'sir qiladi va natijalar o'zgarishiga olib keladi.
Kometa tahlili nima?
Kometa tahlili, shuningdek, bitta gel elektroforez tahlili sifatida ham tanilgan, DNK shikastlanishini aniqlashning oddiy va sezgir usuli. U eukaryotik hujayralardagi DNK uzilishlarini o'lchaydi va biomonitoring va genotoksisite testining standart usuli hisoblanadi.
Kometa tahlili past erish nuqtasi bo'lgan agaroz suspenziyalaridagi hujayralarni inkapsulyatsiya qilishda, neytral yoki ishqoriy sharoitda hujayralarni lizizlashda va to'xtatilgan lizis hujayralarning elektroforezida ishtirok etadi. Kapsülleme jarayonida hujayralar eritilgan past erish nuqtasi bo'lgan agarozada to'xtatiladi va agaroza ularni joyiga qo'yish uchun uglevod tolalari matritsasini hosil qiladi. Agaroza osmotik neytraldir; shuning uchun u eritmalarning jel orqali kirib borishini va hujayralarni bezovta qilmasdan va siljitmasdan ta'sir qilishiga imkon beradi. Lizis eritmasi yuqori konsentrlangan suvli tuz eritmasi va yuvish vositasidir. Bu tuz hujayradagi RNK tarkibini buzgan holda oqsillarni va hujayra ichidagi bog'lanish naqshlarini buzadi. Hujayralar vayron bo'ladi va barcha oqsillar, RNK, sitoplazmatik va nukleoplazmatik tarkibiy qismlar, agaroz matritsaga tarqaladi va DNKni qoldirib ketadi.
02-rasm: Kometa tahlili
Elektroforez eritmasi ishqoriy eritma bo’lib, bunda DNK qo’sh spiral denaturatsiyalanadi va nukleoid bir ipli bo’ladi. Ushbu jarayon davomida tasvirlarni tahlil qilish uchun elektr maydoni qo'llaniladi. Rasm tahlili DNK va nukleoid uchun floresansning umumiy intensivligini o'lchaydi va ikkalasini taqqoslaydi. Umumiy struktura qolgan buzilmagan DNKga mos keladigan dumaloq boshli va shikastlangan DNK uchun quyruqli kometaga o'xshaydi. Kuchli signallar tufayli dum qanchalik yorqinroq va uzunroq bo'lsa, shikastlanish darajasi shunchalik yuqori bo'ladi.
Mikronukleus va kometa tahlili oʻrtasidagi oʻxshashliklar qanday?
- Mikronukleus va kometa tahlili tejamkor, tezroq, qulay va kamroq malaka talab qiladi.
- Ular asosan DNKda bajariladi.
- Ikkala tahlil mutatsiyalar va xromosoma anomaliyalarini baholashda yordam beradi.
- Bundan tashqari, ikkala usul ham protsedurani bajarish uchun kimyoviy moddalardan foydalanadi.
Mikronukleus va kometa tahlili oʻrtasidagi farq nima?
Mikronukleus tahlili mutagen ta'siri natijasida xromosoma shikastlanishini tekshirishda, kometa tahlili esa alohida hujayralardagi birlamchi DNK shikastlanishini aniqlashda muhim ahamiyatga ega. Shunday qilib, bu mikronukleus va kometa tahlili o'rtasidagi asosiy farq. Shuningdek, mikronukleus tahlili klastogenlik va anevjeniklikni aniqlash uchun yaxshi o'rnatilgan. Kometa tahlili hujayralardagi asosiy DNK shikastlanishini aniqlash uchun genotoksisite testi sifatida ishlatiladi. Bundan tashqari, mikronukleus tahlili kimyoviy moddalarning barqarorligi haqida ma'lumot beradi, kometa tahlili esa bitta hujayrali gel elektroforezidir.
Quyidagi infografikada mikroyadro va kometa tahlili oʻrtasidagi farqlar yonma-yon taqqoslash uchun jadval koʻrinishida keltirilgan.
Xulosa – Mikronukleus va kometa tahlili
Genotoksisite tahlillari mutatsiyalar va xromosoma anomaliyalari imkoniyatlarini baholashga yordam beradi. Mikronukleus tahlili va kometa tahlili genotoksiklik tahlillari ostida ikkita usuldir. Mikronukleus tahlili mutagen ta'siri natijasida xromosoma shikastlanishini baholaydi. Kometa tahlili DNK shikastlanishini aniqlashning oddiy va sezgir usulidir. Shunday qilib, bu mikronukleus va kometa tahlili o'rtasidagi asosiy farq. Mikronukleus tahlili shpindel shakllanishiga va mikroyadrolarga olib keladigan kimyoviy moddalarni tekshirishda muhim ahamiyatga ega. Kometa tahlili past erish nuqtasi bo'lgan agaroz suspenziyalaridagi hujayralarni kapsulalashda, neytral yoki ishqoriy sharoitda hujayralarni lizis qilishda va to'xtatilgan lizis hujayralari elektroforezida ishtirok etadi.
