BCA va Bredford tahlili oʻrtasidagi asosiy farq shundaki, BCA tahlili koʻp vaqt talab etadi va unchalik aniq emas, Bredford tahlili esa tez va aniq.
BCA va Bredford tahlili oqsil kontsentratsiyasini aniqlashning ikkita tahlil usulidir. Bu ikki tahlil turlicha tahlil tamoyillari va ularning aniqligidagi farqlarga ega.
BCA tahlili nima?
BCA tahlili yoki bitsinxonin kislotasi tahlili eritmadagi oqsilning umumiy kontsentratsiyasini aniqlashda foydali bo'lgan biokimyoviy tahlildir. Bu usul ixtirochisi Pol K. Smit sharafiga Smit tahlili deb ham ataladi. Ushbu analitik usul Lowry protein tahlili, Bradford oqsil tahlili yoki biuret reagentiga o'xshashlikni ko'rsatadi. Yashildan binafsha ranggacha bo'lgan namuna eritmasining rangi o'zgarishi orqali ma'lum bir namunadagi umumiy oqsil kontsentratsiyasini kuzatishimiz mumkin. Bu rang o'zgarishi protein tarkibiga mutanosib ravishda sodir bo'ladi. Keyin rang intensivligi va namunadagi oqsil miqdorini tahlil qilish uchun kolorimetrik texnikadan foydalanishimiz mumkin.
BCA Proteinni baholash usuli
BCA tahlili mexanizmini ko'rib chiqsak, odatdagi BCA eritmasi pH darajasi taxminan 11,25 bo'lgan yuqori ishqoriy eritmani o'z ichiga oladi va bu eritma tarkibiga bitsinxonin kislotasi, natriy karbonat, natriy bikarbonat, natriy tartrat va boshqalar kiradi. mis (II) sulfat pentagidrat. Ushbu tahlil asosan ikkita kimyoviy reaktsiyaga bog'liq: oqsildagi peptid bog'lanishlari orqali mis (II) ning mis (I) ga kamayishi va bitsinxonin kislotasining ikki molekulasini mis (I) ioni bilan xelyatsiyasi, natijada binafsha rangli kompleks hosil bo'ladi. 562 nm to'lqin uzunligida yorug'likni yutadi. Birinchi reaksiyada peptid bog'lari bilan kamaytirilgan mis (II) miqdori namunadagi oqsil miqdoriga proportsional bo'ladi.
Bredford tahlili nima?
Bradford tahlili eritmadagi oqsil kontsentratsiyasini o'lchashda foydali bo'lgan spektroskopik analitik usuldir. Bu usul 1976 yilda Marion M. Bredford tomonidan ishlab chiqilgan bo'lib, u nisbatan tez va aniq usuldir.
Protein va Bredford reagentining rangli reaksiyasi
Biz bu usuldan namunadagi oqsil miqdori kontsentratsiyasini aniqlash uchun foydalanishimiz mumkin. Ushbu tahlil davomida namunada sodir bo'ladigan kimyoviy reaktsiya faqat namunadagi oqsilning aminokislotalar tarkibiga bog'liq.
Bredfordda proteinni baholash usuli
Ushbu tahlil usulini koʻrib chiqsak, bu Coomassie Brilliant Blue G-250 nomli boʻyoqning absorbans siljishiga asoslangan kolorimetrik oqsil tahlilidir. Umuman olganda, bu bo'yoq anion (ko'k) shakl, neytral (yashil) shakl va katyonik (qizil) shaklda uch shaklda mavjud. Shuning uchun kislotali sharoitda bo'yoq rangini qizildan ko'kgacha o'zgartiradi. Buning sababi oqsilning bo'yoq bilan bog'lanishi. Aksincha, agar bo'yoq bilan bog'lash uchun protein bo'lmasa, rang o'zgarishi ko'rinmaydi, eritma qizil-jigarrang rangga ega bo'ladi. Ushbu bo'yoq Van der Vaal kuchlari va elektrostatik tortishishlar orqali oqsilning karboksil guruhi bilan kuchli, nokovalent kompleks hosil qilishga qodir.
BCA va Bradford Assay o'rtasidagi farq nima?
BCA va Bredford tahlili oqsil kontsentratsiyasini aniqlashning ikkita tahlil usulidir. Bu ikki tahlil turli xil tahlil tamoyillariga va ularning aniqligidagi farqlarga ega. BCA va Bredford tahlili o'rtasidagi asosiy farq shundaki, BCA tahlili ko'p vaqt talab qiladigan va kamroq aniq, Bredford tahlili tez va aniq.
Quyidagi infografikada BCA va Bredford tahlili oʻrtasidagi farqlar jadval koʻrinishida jamlangan.
Xulosa – BCA vs Bradford Assay
BCA tahlili yoki bitsinxonin kislotasi tahlili eritmadagi oqsilning umumiy kontsentratsiyasini aniqlashda foydali bo'lgan biokimyoviy tahlildir. Bredford tahlili eritmadagi oqsil kontsentratsiyasini o'lchashda foydali bo'lgan spektroskopik analitik usuldir. BCA va Bredford tahlili o'rtasidagi asosiy farq shundaki, BCA ko'p vaqt sarflaydi va kamroq aniq, Bredford tahlili esa tez va aniq.
