Bredford va Lowry protein tahlili o'rtasidagi asosiy farq shundaki, Bredford oqsili tahlili Coomassie yorqin ko'k G-250 bo'yog'ining yutilish siljishiga asoslangan, Lowry protein tahlili esa mis ionlari (Cu+) ionlarining reaktsiyasiga asoslangan. peptid bog'larini Folin-Cioc alteu reagenti bilan oksidlanishi natijasida hosil bo'ladi.
Tahlil - bu namunaning asosiy funktsional komponentlarini tavsiflashga yordam beradigan analitik usul. Shunday qilib, tahlil sifat yoki miqdoriy test bo'lishi mumkin. Laboratoriya tibbiyoti, farmakologiya, atrof-muhit biologiyasi, molekulyar biologiya, biokimyo va immunologiya kabi ko'plab sohalarda bunday tahlillar muntazam ravishda qo'llaniladi. Bredford va Lowry protein tahlili namuna eritmasidagi oqsil kontsentratsiyasini aniqlaydigan ikkita biokimyoviy tahlildir. Ikkala tahlil ham natijalarni berish uchun kolorimetrik usullardan foydalanadi.
Bredford oqsil tahlili nima?
Bradford oqsil tahlili oqsil tahlili uchun tezkor spektroskopik analitik protseduradir. Protein kontsentratsiyasini eritmada o'lchashda yuqori aniqlikni ko'rsatadi. Marion Bredford ushbu protsedurani 1976 yilda kiritgan. Ushbu tahlilda umumiy reaktsiya o'lchangan oqsillarning aminokislotalar tarkibiga asoslanadi. Boshqacha qilib aytganda, Bredford protein tahlili kolorimetrik tahlildir. Bu Coomassie yorqin ko'k bo'yoqdan foydalanadi. Demak, bu kolorimetrik oqsil tahlili bo'yoqning absorbsiya siljishiga bog'liq. Coomassie yorqin ko'k G-250 uchta formatda mavjud: katyonik (qizil), anion (ko'k) va neytral (yashil). Kislotali sharoitda bo'yoqning qizil shakli ko'k rangga aylanadi. Bu proteinning bog'lanishini tasdiqlaydi. Protein bo'lmasa, eritma jigarrang rangda qolishi mumkin.
01-rasm: Bredford oqsil tahlili
Bradford oqsil tahlili boshqa protein tahlillaridan farq qiladi, chunki u protein eritmasida mavjud bo'lgan turli kimyoviy birikmalarning aralashuviga kamroq sezgir. Bu birikmalarga natriy, kaliy, glyukoza va saxaroza va boshqalar kiradi.
Loury protein tahlili nima?
Lowry protein tahlili - bu eritmadagi oqsilning umumiy darajasini aniqlash uchun ishlatiladigan biokimyoviy tahlil. Oliver H. Lowry 1940 yilda ushbu reagentni ishlab chiqqan shaxsdir. Jarayon eritmadagi oqsil kontsentratsiyasiga mutanosib bo'lgan rang o'zgarishi bilan eritmaning umumiy oqsil kontsentratsiyasini tasvirlaydi. Demak, bu ham kolorimetrik oqsil tahlilidir.
Peptid bogʻlanishlarining oksidlanishi natijasida hosil boʻlgan mis ionlari (Cu+) va Folin-Cioc alteu reagenti oʻrtasidagi reaksiya bu jarayonning asosi hisoblanadi. Shuningdek, ushbu reagent tarkibida fosfomolibdik kislota va fosfor-volfram kislotasi mavjud. Biroq, Lowry protein tahlilining reaktsiya mexanizmi yaxshi tushunilmagan. Ammo u Folin-Cioc alteu reagentini kamaytirish orqali sistein, triptofan va tirozin qoldiqlarini oksidlanishini o'z ichiga oladi.
02-rasm: Lowry protein tahlili
Sistein qoldiqlari Lowry protein tahlilida kuzatilgan absorbansga hissa qo'shadi va reaktsiya yorqin ko'k molekulaga olib keladi; heteropoliyali molibden ko'k. Ushbu molekulaning qisqarishi 660nm da absorbans bilan o'lchanadi. Demak, Folin-Cioc alteu reagentini kamaytiradigan sistein va triptofan qoldiqlari konsentratsiyasi eritmadagi oqsilning umumiy konsentratsiyasini aniqlaydi.
Bredford va Lowry protein tahlili o'rtasidagi o'xshashliklar qanday?
- Bradford va Louri protein tahlillari eritmadagi oqsil kontsentratsiyasini aniqlaydi.
- Ikkala usul ham kolorimetrik usullardir.
- Shuningdek, ikkala usulning sezgirligi ham yuqori.
Bredford va Lowry protein tahlili o'rtasidagi farq nima?
Bradford va Lowry oqsil tahlillari eritmadagi oqsil kontsentratsiyasini aniqlaydigan ikki turdagi tahlillardir. Bredford oqsili tahlili Coomassie yorqin ko'k G-250 bo'yog'ining yutilish siljishiga tayanadi, Louri oqsili tahlili esa peptid aloqalarining oksidlanishi natijasida hosil bo'lgan mis ionlarining Folin-Cioc alteu reagenti bilan reaktsiyasiga bog'liq. Shunday qilib, bu Bredford va Lowry protein tahlili o'rtasidagi asosiy farq. Bredford protein tahlilida natija olish uchun 15 daqiqa, Lowery protein tahlilida esa 40-60 daqiqa vaqt ketadi. Shunday qilib, bu Bredford va Lowry protein tahlili o'rtasidagi yana bir farq. Bundan tashqari, Bredford protein tahlili aminokislotalar tarkibiga bog'liq bo'lsa, Lowry protein tahlili qisman aminokislotalar tarkibiga bog'liq. Demak, bu Bredford va Louri protein tahlili o'rtasidagi farqdir.
Quyida inforafikda Bredford va Louri protein tahlili oʻrtasidagi farq haqida batafsil maʼlumot berilgan.
Xulosa – Bredford va Louri protein tahlili
Tahlil - bu namunaning asosiy funktsional komponentini tavsiflash uchun ishlatiladigan analitik usul. Bredford va Lowry protein tahlillari kolorimetrik usullar ostida ishlaydigan ikki turdagi protein tahlillaridir. Bredford va Lowry protein tahlillari eritmadagi oqsil kontsentratsiyasini aniqlaydi. Biroq, Bredford va Lowry Protein Assay o'rtasidagi asosiy farq ular foydalanadigan kolorimetrik texnikaga bog'liq. Bredford oqsil tahlili Coomassie yorqin ko'k G-250 dan, Lowry oqsil tahlilida esa mis ionlari (Cu+) ionlari va Folin-Cioc alteu reagentidan foydalaniladi. Bundan tashqari, Bredford usuli Lowry protein tahliliga qaraganda tez natijalar beradi. Biroq, ikkala usul ham juda sezgir usullardir va turli moddalarning shovqinlariga duchor bo'ladi.
