Toʻgʻridan-toʻgʻri va bilvosita immunofluoressensiya oʻrtasidagi asosiy farq shundaki, toʻgʻridan-toʻgʻri immunofluoresans qiziqish nishoniga qarshi ishlaydigan yagona antikordan foydalanadi, bilvosita immunofluoresans esa qiziqish nishonini belgilash uchun ikkita antikordan foydalanadi.
Immunofloressensiya yoki hujayra tasviri - bu aniq maqsadli antigenni ftorfor bilan belgilash uchun ishlatiladigan usul. Bu erda florofor yorug'lik qo'zg'alganda yorug'likni qayta chiqaradigan lyuminestsent kimyoviy birikmadir. Ftoror maqsadli antijen bilan bog'langanda, u namunadagi maqsadli molekulani aniqlash imkonini beradi. Buni yanada ta'riflash uchun, antigen o'ziga xos antikor bilan bog'langanda, u ftoroforlar bilan konjugatsiyalanishi mumkin. Shunday qilib, lyuminestsent mikroskop ostida kuzatishda namunadagi maqsadli antigen mavjudligini aniqlash oson.
Bundan tashqari, immunofloressensiyaning ikki turi mavjud; to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita immunofluoresans. To'g'ridan-to'g'ri va bilvosita immunofluoresans o'rtasidagi farq, asosan, ishlatiladigan antikorlar soni va ftorfor konjugatsiyasiga bog'liq. Ya'ni, to'g'ridan-to'g'ri immunofloressensiyada florofor birlamchi antikorga bevosita konjugatsiya qiladi, bilvosita immunofloressensiyada esa ftorofor ikkilamchi antikor bilan konjugatsiyalanadi.
Toʻgʻridan-toʻgʻri immunofloressensiya nima?
Immunofluoressensiya maxsus maqsadli antijenlarni aniqlash uchun antikorlardan foydalanadi. To'g'ridan-to'g'ri immunofloressensiya ikki turdagi immunofluoresansdan biridir. To'g'ridan-to'g'ri immunofloressensiyada bitta antikor (birlamchi antikor) ishtirok etadi va florofor birlamchi antikor bilan bevosita konjugatsiya qiladi. Antikorni maqsadli antijen bilan bog'lagandan so'ng, flüorofor floresan mikroskop tomonidan aniqlanishi mumkin bo'lgan floresans chiqaradi.
01-rasm: Toʻgʻridan-toʻgʻri immunofluoressensiya
Biroq, toʻgʻridan-toʻgʻri immunofloressensiya qimmat usul hisoblanadi, chunki birlamchi konjugatsiyalangan antikorlar ikkilamchi antikorlarga nisbatan qimmatga tushadi. Shunga qaramay, bu qo'shimcha bosqichni, shuning uchun qisqaroq texnikani o'z ichiga olmaydi. Bundan tashqari, to'g'ridan-to'g'ri immunofloressensiyada o'ziga xos bo'lmagan bog'lanishlar kamayadi. Shunday qilib, turlarning o'zaro reaktivligi past. Ammo aniqlashda to'g'ridan-to'g'ri immunofluoressensiyaning sezgirligi bilvosita immunofloressensiyaga nisbatan zaifdir.
Bilvosita immunofluoressensiya nima?
Bilvosita immunofloressensiya immunofluoressensiyaning ikkinchi turi boʻlib, maqsadli antigenni belgilashda birlamchi va ikkilamchi antikorlar kabi ikki turdagi antikorlarni oʻz ichiga oladi. Bu usulda florofor ikkilamchi antikor bilan konjugatsiyalanadi. Demak, bu usul qoʻshimcha bosqichni oʻz ichiga oladi.
02-rasm: Immunfloresans
Biroq, bu usulda sezuvchanlik yuqori, chunki bir nechta ftoroforlar ikkilamchi antikorlarga konjugatsiyalanishi mumkin va bu aniqlashni osonlashtiradi. Bundan tashqari, bilvosita immunofloressensiya ikkilamchi antikorlarning konjugatsiyasi arzonroq va osonroq bo'lganligi sababli arzonroqdir. To'g'ridan-to'g'ri immunofloressensiya bilan solishtirganda, bilvosita usulda turlarning o'zaro reaktivligi yuqori.
Toʻgʻridan-toʻgʻri va bilvosita immunofloressensiya oʻrtasidagi oʻxshashliklar qanday?
- Bular ikki xil immunofluoresans texnikasi.
- Birlamchi antikorlar va florofor ikkala usulda ham ishtirok etadi.
- Shuningdek, antigen-antikor reaktsiyasi ikkala usulda ham sodir bo'ladi.
- Bundan tashqari, toʻgʻridan-toʻgʻri va bilvosita immunofloressensiyada antigenni aniqlash uchun floresan mikroskopdan foydalaniladi.
Toʻgʻridan-toʻgʻri va bilvosita immunofluoressensiya oʻrtasidagi farq nima?
Immunofloressensiya ishlatiladigan antikorlar bilan florofor konjugasiyasi asosida bevosita yoki bilvosita bo'lishi mumkin. To'g'ridan-to'g'ri immunofloressensiyada florofor birlamchi antikor bilan konjugatsiyalanadi, bu esa ushbu texnikada ishtirok etadigan yagona antikordir. Bundan farqli o'laroq, bilvosita immunofloressensiyada florofor texnikada ishtirok etadigan ikki turdagi antikorlardan biri bo'lgan ikkilamchi antikor bilan konjugatsiyalanadi. Demak, to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita immunofluoresans o'rtasidagi asosiy farq ftorfor bilan konjugatsiya qiluvchi antikor turidir.
Quyidagi infografikada toʻgʻridan-toʻgʻri va bilvosita immunofluoressensiya oʻrtasidagi farqni yonma-yon taqqoslash keltirilgan.
Xulosa – Toʻgʻridan-toʻgʻri va bilvosita immunofluoressensiya
Immunofluoresans - bu namunadagi o'ziga xos antijenlarning mavjudligini aniqlash uchun ishlatiladigan usul. Ushbu texnikada maxsus antikorlar qo'llaniladi. Shuning uchun, bunda antikorlar flüoresan mikroskop yordamida aniqlash uchun floroforlar bilan konjugatsiyalanadi. Bundan tashqari, immunofloressensiyaning ikki turi mavjud, ya'ni to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita immunofluoresans. To'g'ridan-to'g'ri immunofloressensiya bitta antikorni va bu antikorga bevosita konjugatsiyalangan floroforni o'z ichiga oladi. Bilvosita immunofloressensiya ikkita antikorni o'z ichiga oladi; birlamchi va ikkilamchi va ftorfor ikkilamchi antikor bilan konjugatsiyalangan. Bir nechta ikkilamchi antikorlar birlamchi antikor bilan bog'lanishi va bir nechta floroforlar ikkilamchi antikorlar bilan birlashishi mumkinligi sababli, bilvosita immunofloressensiya to'g'ridan-to'g'ri usulga qaraganda sezgirroqdir. Bundan tashqari, bilvosita usul to'g'ridan-to'g'ri usulga qaraganda arzonroq. Shunday qilib, bu to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita immunofluoresans o'rtasidagi farq.
