Asosiy farq – Immunofloressensiya va immunogistokimyo
Molekulyar biologik usullardan foydalanadigan kasalliklar diagnostikasi klinik laboratoriya texnologiyasining rivojlanayotgan sohasiga aylandi. U organizmdagi DNK, RNK yoki ifodalangan oqsillarni tahlil qilish orqali kasallikni aniqlash va kasallikning sababini tushunish uchun barcha testlar va usullarni o'z ichiga oladi. Molekulyar diagnostikaning jadal rivojlanishi yuqumli va yuqumli bo'lmagan kasalliklar bo'yicha fundamental tadqiqotlar o'tkazish imkonini berdi. Ular kasallikda ishtirok etadigan hal qiluvchi genlar yoki oqsillardagi ketma-ketlik yoki ifoda darajalaridagi o'zgarishlarni aniqlash uchun ishlatiladi. Immunofloressensiya (IF) va Immunohistokimyo (IHC) saraton biologiyasida keng qo'llaniladigan ikkita usuldir. IF IHC turi bo'lib, floresan aniqlash usuli monoklonal va poliklonal antikorlarni tahlil qilish uchun ishlatiladi, IHC esa monoklonal va poliklonal antikorlarni aniqlash uchun kimyoviy asoslangan usullardan foydalanadi. Bu IF va IHC o'rtasidagi asosiy farq.
Immunofluoressensiya (IF) nima?
Immunofluoresans - bu aniqlash usuli bo'lib, tahlilda ishlatiladigan antikorlar aniqlash maqsadida floresan bo'yoqlar yoki lyuminestsent oqsillar yordamida etiketlanadi. Belgilangan ikkilamchi antikorlar kiruvchi fon signallariga olib kelishi mumkin; shuning uchun IF texnikasi aniqlash paytida kiruvchi signallarning oldini olish uchun hozirgi vaqtda asosiy antikorning o'zini belgilashga asoslangan. Ushbu usul yordamida birlamchi va ikkilamchi antikorlar o'rtasidagi o'ziga xos bo'lmagan bog'lanishning oldini oladi va u tezroq bo'ladi, chunki ikkilamchi inkubatsiya bosqichi mavjud emas. Maʼlumotlar sifati ham yaxshilandi.
01-rasm: BrdU, NeuN va GFAP uchun ikki marta immunofluoresans bilan bo'yash
Ftoroxromlar yoki lyuminestsent boʻyoqlar radiatsiyani, tercihen qoʻzgʻatuvchi ultrabinafsha nurlanishni oʻzlashtira oladigan birikmalardir. Zarrachalar hayajonlangan holatdan asosiy holatga yetganda, ular spektrni hosil qilish uchun detektor tomonidan tutilgan va aniqlangan nurlanish chiqaradi. Floresan yorlig'i muayyan reaktsiya uchun mos va barqaror bo'lishi va aniq natijalarga erishish uchun antikor bilan to'g'ri konjugatsiya qilinishi juda muhimdir. Eng ko'p ishlatiladigan ftoroxromlardan biri yashil rangga ega bo'lgan fluorescein izotiosiyanat (FITC) bo'lib, mos ravishda 490 nm va 520 nm yutilish va emissiya tepalik to'lqin uzunligiga ega. Rodamin, IF da qo'llaniladigan boshqa agent, qizil rangga ega va 553 nm va 627 nm bo'lgan aniq yutilish va emissiya tepalik to'lqin uzunligiga ega.
Immunohistokimyo (IHC) nima?
IHC - maqsadli hujayrada antijen mavjudligini aniqlash va tasdiqlash uchun qo'llaniladigan molekulyar sinov usuli. Maqsadli hujayra yuqumli zarracha, mikrobial patogen yoki xatarli o'simta hujayrasi bo'lishi mumkin. IHC maqsadli hujayralarning hujayra yuzasida mavjud bo'lgan antijenlarning mavjudligini aniqlash uchun monoklonal va poliklonal antikorlardan foydalanadi. Texnika antigen-antikor bog'lanishiga asoslangan. Muayyan antigenning mavjudligi yoki yo'qligini aniqlash uchun aniqlovchi marker ushbu antikorlarga konjugatsiya qilinadi. Bu belgilar fermentlar, lyuminestsent bilan belgilangan antikorlar yoki radio yorliqli antikorlar kabi kimyoviy belgilar bo'lishi mumkin.
02-rasm: Immunogistokimyo bo'yalgan sichqon-miya bo'lagi
IHC ning eng mashhur qoʻllanilishi saraton hujayralari biologiyasida xatarli oʻsmalar mavjudligini aniqlashdir, lekin u yuqumli kasalliklarni aniqlashda ham qoʻllaniladi.
Immunofloressensiya va immunohistokimyo oʻrtasidagi oʻxshashliklar qanday?
- Immunofluoressensiya va immunohistokimyo in vitro sharoitda amalga oshiriladi.
- Ikkala usul ham antigen-antikorga asoslangan
- Ikkalasi ham juda tez texnika.
- Texniklarning natijalari takrorlanishi mumkin.
- Ikkalasida ham maʼlumotlar sifati yaxshilandi.
- Bu usullar saraton va yuqumli kasalliklar diagnostikasida qoʻllaniladi.
Immunofloressensiya va immunohistokimyo oʻrtasidagi farq nima?
Immunofluoressensiya va immunogistokimyo |
|
| IF bu aniqlash usuli boʻlib, tahlilda ishlatiladigan antikorlar aniqlash uchun floresan boʻyoqlar yoki lyuminestsent oqsillar yordamida etiketlanadi. | IHC bu aniqlash usuli boʻlib, tahlilda ishlatiladigan antikorlar aniqlash uchun kimyoviy moddalar yoki radioaktiv elementlardan foydalangan holda etiketlanadi. |
| Aniqlik | |
| IHC bilan solishtirganda IF texnikasida aniqlik yuqoriroq. | IHCda aniqlik pastroq. |
| Oʻziga xoslik | |
| AGAR aniqroq. | IHC unchalik aniq emas. |
Xulosa – Immunofluoressensiya va immunohistokimyo
Molekulyar mexanizmlar tibbiyot sohasida ko'plab o'zgarishlarni keltirib chiqardi, bu esa diagnostika sohasida inqiloblarni keltirib chiqargan ilg'or molekulyar test usullarini keltirib chiqardi. Ushbu ixtirolar kasallikni tez va aniq aniqlash va tasdiqlashga olib keldi va shu bilan dori vositalarini muvaffaqiyatli qo'llash va ishlab chiqarish imkonini berdi. Bu usullar farmakologiyada dori vositalarining maqsadlarini topish va dori almashinuvi jarayonida preparatning farmakokinetik xususiyatlarini tasdiqlash uchun ham qo'llaniladi. IF va IHC ikkita diagnostika usuli bo'lib, ular antigen va antikorlarni bog'lash kontseptsiyasiga asoslangan, ammo ikkala usulda ham aniqlash usuli farq qiladi. IF antigenni aniqlash uchun floresans printsipidan foydalanadi va IHC antigenni aniqlash uchun kimyoviy konjugatsiya kontseptsiyasidan foydalanadi. Bu IF va IHC o'rtasidagi farq.
Immunofluoressensiya va immunohistokimyoning PDF versiyasini yuklab oling
Siz ushbu maqolaning PDF-versiyasini yuklab olishingiz va iqtibos keltirgan holda oflayn maqsadlarda foydalanishingiz mumkin. Iltimos, PDF versiyasini bu yerdan yuklab oling Immunofloressensiya va immunohistokimyo o'rtasidagi farq.
