Asosiy farq – nitroselüloza va neylon membrana
Blotting molekulyar biologiyada DNK, RNK va oqsillarning oʻziga xos ketma-ketliklarini ularning aralashmalaridan aniqlashning muhim usuli hisoblanadi. Bu blot deb ataladigan membrana yordamida amalga oshiriladi. Shimoliy, janubiy va g'arbiy bloting kabi turli xil tozalash usullari mavjud. Nostandart bog'lanish va noto'g'ri aniqlashning oldini olish uchun tozalash jarayoni uchun to'g'ri membranani tanlash ehtiyotkorlik bilan bajarilishi kerak. Nitrotsellyuloza, neylon va PVDF odatda quritish texnikasida qo'llaniladigan membranalardir. Ular turli xil xususiyatlarga ega. Nitrotsellyuloza va neylon membrana o'rtasidagi asosiy farq shundaki, nitroselüloza membranalari yuqori protein immobilizatsiya potentsialiga ega, neylon membranalar esa nuklein kislotasi yuqori immobilizatsiya potentsialiga ega. Biroq, har ikki turdagi membranalar ham tozalash texnikasida tez-tez ishlatiladi.
Nitroselüloza membranasi nima?
Nitrotsellyuloza membranasi nuklein kislota va oqsillarni tozalash usullarida keng qo'llaniladigan membrana filtridir. U yuqori protein bog'lash potentsialiga ega. Demak, nitrotsellyuloza membranalari western blotting texnikasida keng qo'llaniladi. Nitrotsellyuloza membranalari barcha gibridizatsiya usullariga mos keladi va shovqinlarsiz yuqori bog'lanish qobiliyatini namoyish etadi. Nitrotsellyuloza membranalari tabiiy ravishda hidrofil tabiatga ega. Ular molekulalar bilan gidrofilik o'zaro ta'sir qiladi va ularni membranaga samarali immobilizatsiya qiladi. Tijorat nitrotsellyuloza membranalari ikkita teshik o'lchamida mavjud: 0,45 va 0,2 mkm.
01-rasm: western blottingda ishlatiladigan nitrotsellyuloza membranasi
Neylon membrana nima?
Neylon membrana tozalash texnikasida qo'llaniladigan boshqa turdagi tijorat membranadir. Muqobil ravishda janubiy va shimoliy blot uchun nitroselüloz membranalar bilan ishlatiladi. Neylon membranalar DNK bilan bog'lanishga yuqori darajada yaqinligi tufayli nitroselülozaga qaraganda janubiy blot uchun idealdir. Neylon membranalarning bir nechta o'ziga xos xususiyatlari tufayli tadqiqotchilar nitroselüloz membranasi o'rniga janubiy va shimoliy blot uchun neylon membranalardan foydalanadilar. Neylon membranalar, shuningdek, nitroselülozadan farqli o'laroq, tozalash va qayta tekshirish uchun tavsiya etiladi.
02-rasm: janubiy tozalash uchun neylon membrana ishlatiladi
Nitroselüloza va neylon membrana o'rtasidagi farq nima?
Nitroselüloza va neylon membrana |
|
| Nitrotsellyuloza membranalari mo'rt. | Neylon membranalar kamroq mo'rt. |
| Boshlash | |
| Ularni boshqarish qiyin. | Ularni boshqarish oson. |
| Tanbatlash | |
| Qoʻllab-quvvatlanmaydigan nitrotsellyuloza membranalarini qayta tekshirish qiyin. | Neylon membranalar bilan qayta tekshirish oson. |
| Turli saqlash sharoitlari bilan moslik | |
| Nitrotsellyuloza membranalari turli xil saqlash sharoitlariga bardosh berish uchun kamroq kuchga ega. | Neylon membranalar turli xil saqlash sharoitlariga mustahkamroq javob beradi. |
| Foydalanish | |
| Oldindan namlash kerak. | Neylon membranalar uchun oldindan namlash shart emas. |
| Gidrofil tabiat | |
| Nitrotsellyuloza membranalari tabiatda hidrofil, ammo neylon membranalarga qaraganda kamroq hidrofilikdir. | Ular tabiatan juda hidrofil. |
| Immobilizatsiya potentsiali | |
| Nitrotsellyuloza membranalari nuklein kislotalarga nisbatan kamroq yaqinlikka ega. Ammo uning oqsillarga yaqinligi yuqori. | Neylon membranalar nitrotsellyuloza membranalariga qaraganda nuklein kislotalar bilan yuqori bogʻlanish potentsialiga ega. |
Xulosa – nitroselüloza va neylon membrana
Nitrotsellyuloza va neylon membranalar jel ustidagi tasma naqshini takrorlash uchun blotting texnikasida qo'llaniladigan maxsus varaqlardir. Ular membranada immobilizatsiya qilish orqali aralashmalardan ma'lum bir ketma-ketlikni yoki oqsilni aniqlash imkoniyatini beradi. Molekulalar membranada immobilizatsiya qilingandan so'ng, u etiketli zondlar bilan gibridizatsiya tahlili uchun substrat sifatida ishlatilishi mumkin. Nitrotsellyuloza membranasi oqsillar bilan yuqori darajada bog'langanligi sababli g'arbiy blotting texnikasida oqsillarni aniqlash uchun keng qo'llaniladi. Neylon membranalar ko'pincha janubiy va shimoliy blotting uchun ishlatiladi. Bu nitroselüloza va neylon membrana o'rtasidagi farq.
