Asosiy farq – Toʻgʻridan-toʻgʻri va bilvosita ELISA
Enzim immunoassay deb ham ataladigan ferment bilan bogʻliq immunoassay (ELISA) qondagi antikorlarni aniqlaydigan serologik testdir. Bemorga ma'lum turdagi virus yoki boshqa yuqumli agent (antigen) ta'siriga duchor bo'lganligini va organizmda infektsiyaga qarshi antitellar ishlab chiqarilganligini aniqlash uchun diagnostika vositasi sifatida foydalaniladi. Elishay, shuningdek, o'tmishdagi va hozirgi infektsiyalarni aniqlashi mumkin. Shunday qilib, Elishay ko'pincha shifokorlar tomonidan kasalliklarni chuqur tahlil qilishdan oldin skrining tekshiruvi sifatida qo'llaniladi. Ushbu test laboratoriyada bemordan qon namunasini olish orqali amalga oshirilishi mumkin. Elishay testining ikki turi mavjud: to'g'ridan-to'g'ri Elishay va bilvosita Elishay. To'g'ridan-to'g'ri va bilvosita Elishay o'rtasidagi asosiy farq shundaki, bilvosita Elishay sezgirroq va ikkilamchi antikor qo'shishni talab qiladi, to'g'ridan-to'g'ri Elishay esa kamroq sezgir va faqat birlamchi antikordan foydalanadi.
Bevosita ELISA nima?
ELISA - qonda ma'lum antijenler yoki antikorlar mavjudligini aniqlash uchun o'tkaziladigan kasallik diagnostikasi. Bu plastinka tahlili sifatida amalga oshiriladi. U oson tahlil qilinadigan fermentlar bilan bog'langan antikorlardan foydalanadi. Sarum namunasida antijenlarning mavjudligi fermentlar bilan bog'langan maxsus antikorlar bilan bog'lanadi. Yakuniy bosqichda ferment bilan reaksiyaga kirishish uchun maxsus substrat qo'shiladi. Ferment substratni rangli yoki signal ishlab chiqaruvchi mahsulotga aylantiradi. Kimyoviy substratdagi rang o'zgarishi sarum namunasida ma'lum bir antikor mavjudligini ko'rsatadi. To'g'ridan-to'g'ri Elishay testi faqat ferment bilan bog'langan asosiy antikordan foydalanadi. Antigen bilan bog'langandan so'ng, u tezda rangni o'zgartiradi, bu qonda yuqumli vosita mavjudligini ko'rsatadi. Biroq, to'g'ridan-to'g'ri Elishayda signallarning intensivligi zaifroq, chunki epitoplar antijenlarni bog'lash bilan cheklangan. Shunday qilib, to'g'ridan-to'g'ri ELISA bilvosita Elishay bilan solishtirganda kamroq sezgir.
01-rasm: Toʻgʻridan-toʻgʻri ELISA testi
Bilvosita ELISA nima?
ELISA ikki turdagi antikorlar yordamida amalga oshirilishi mumkin, xususan; birlamchi antikor va ikkilamchi antikor. Bilvosita ELISA vositasi signallarni yaxshiroq aniqlash uchun kuchaytirish uchun ikkala turdagi antikorlardan foydalanadi. Bilvosita Elishay usuli quyidagicha amalga oshiriladi.
- Plitalar antijenler bilan inkubatsiya qilinadi va spesifik boʻlmagan bogʻlanishni bloklash uchun yuviladi.
- Keyin birlamchi antikorlar qo'shiladi va yuviladi.
- Fermentga bog'langan ikkilamchi antikor qo'shiladi va yuviladi.
- Substrat qoʻshiladi va fermentlar bilan reaksiyaga kirishishi mumkin.
- Signallar aniqlanadi va namunadagi o'ziga xos antigenning mavjudligi yoki yo'qligi aniqlanadi.
Bilvosita Elishay testida bir nechta ikkilamchi antikorlar bitta asosiy antikor bilan bog'lanishi mumkin. Ikkilamchi antikorlar oson tekshiriladigan fermentlar bilan bog'langan. Shuning uchun, bitta bog'lanish bir nechta shovqinlar tufayli kuchli signal berishi mumkin. Demak, bilvosita Elishay to'g'ridan-to'g'ri Elishayga qaraganda sezgirroq. Biroq, bilvosita Elishay ikkilamchi antikorlarning o'zaro reaktsiyalari tufayli o'ziga xos bo'lmagan signallarni berishi mumkin.
02-rasm: bilvosita ELISA testi
Toʻgʻridan-toʻgʻri va bilvosita ELISA oʻrtasidagi farq nima?
Toʻgʻridan-toʻgʻri va bilvosita ELISA |
|
| To'g'ridan-to'g'ri ELISA bilvosita Elishay bilan solishtirganda kamroq sezgir. | Bilvosita ELISA sezgirroq. |
| Olingan vaqt | |
| Toʻgʻridan-toʻgʻri ELISA testi - bu tezkor jarayon. | Bilvosita ELISA koʻp vaqt talab etadi. |
| Antitellardan foydalanish | |
| To'g'ridan-to'g'ri Elishay usulida faqat bitta turdagi antikorlar (Birlamchi antikorlar) qo'llaniladi. | Birlamchi va ikkilamchi antikorlar bilvosita Elishay uchun ishlatiladi. |
| Fermentlar bilan bogʻlanish | |
| Birlamchi antikorlar fermentlar bilan bog'langan. | Ikkinchi darajali antikorlar fermentlar bilan bog'langan. |
| Ikkinchi antikorlarning oʻzaro reaktivligi | |
| Toʻgʻridan-toʻgʻri ELISA ikkinchi antikorlarning oʻzaro reaktivligini yoʻq qiladi. | Bilvosita ELISA ikkinchi antikorlarning oʻzaro reaktivligi bilan taʼsirlanadi. |
| Signallar | |
| Signallar bilvosita Elishay bilan solishtirganda zaif. | Signallar bilvosita ELISAda kuchaytiriladi. Shuning uchun uni aniqlash oson. |
Xulosa – Toʻgʻridan-toʻgʻri va bilvosita ELISA
ELISA - asosan immunologiyada bemorning qon namunasida antikor yoki antigen borligini aniqlash uchun ishlatiladigan biokimyoviy usul. U to'g'ridan-to'g'ri yoki bilvosita Elishay deb nomlanuvchi ikkita jarayon orqali amalga oshirilishi mumkin. To'g'ridan-to'g'ri Elishay testi antigenni aniqlash uchun faqat birlamchi antikorlardan foydalanadi, bilvosita Elishay esa birlamchi va ikkilamchi antikorlardan foydalanadi. To'g'ridan-to'g'ri Elishay usulida birlamchi antikorlar, bilvosita Elishay usulida esa ikkilamchi antikorlar etiketlanadi. Bu to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita Elishay o'rtasidagi farq.
