Immunopresipitatsiya va koimmunopresipitatsiya oʻrtasidagi asosiy farq shundan iboratki, immunopresipitatsiya maʼlum bir antikor yordamida eritmadan oqsilni choʻktirish usulidir, koimmunopretsipitatsiya esa maʼlum bir antikor yordamida eritmadan buzilmagan oqsil komplekslarini choʻktirish usulidir.
Antigen-antikor o'zaro ta'siri - bu immunitet reaktsiyasi paytida B hujayralari tomonidan ishlab chiqarilgan antikorlar va antijenler (oqsillar) o'rtasidagi o'ziga xos kimyoviy o'zaro ta'sir. Odatda, eriydigan antijenler erimaydigan ko'rinadigan kompleks hosil qilish uchun eriydigan harorat va pH darajasida elektrolitlar ishtirokida eriydigan antikorlar bilan birlashadi. Bu yog'ingarchilik reaktsiyasi deb ataladi. Shuning uchun immunoprecipitatsiya va koimmunoprecipitatsiya ikki turdagi cho'kma reaktsiyalari bo'lib, ular laboratoriyalarda antijenlar kabi oqsillarni aniqlash uchun muntazam foydalaniladi.
Immunoprecipitatsiya nima?
Immunoprecipitatsiya - bu ma'lum bir antikor yordamida eritmadan oqsilni cho'ktirish usuli. Ba'zan, bu usul, shuningdek, individual protein immunoprecipitation sifatida ham tanilgan. Immunoprecipitatsiya hujayra lizatidan tanlangan oqsilni ajratib olish uchun antikordan foydalanadi. Antikor o'zining maxsus maqsadli oqsilini yoki antijenini aralashmadan tozalaydi. Antikor oqsil bilan bog'lanadi va antikor-antigen kompleksi namunadan chiqariladi. Eksperimental o'rnatishda antigen-antikor kompleksi A/G oqsili bilan bog'langan agaroza yoki magnit boncuklar yordamida chiqariladi. Keyinchalik, boncuklar yuviladi va qiziqish oqsili elut qilinadi. Immunopresipitatsiya natijasida olingan tozalangan oqsil yoki antigen ferment bilan bog'langan immunosorbent tahlili (ELISA) va western blot (WB) kabi turli usullar bilan tekshiriladi.
01-rasm: Immunitetsizlanish
Bundan tashqari, ajratilgan oqsillar yoki antijenlarni birlamchi ketma-ketlikka asoslangan fermentativ hazm qilish usullaridan foydalangan holda massa spektrometriyasi orqali aniqlash va aniqlash mumkin. Immunoprecipitatsiya tajribasini boshlashdan oldin ba'zi fikrlarni hisobga olish kerak: usul formatini tanlash, oqsillar va boncuklarni bog'lash, to'g'ri asosiy antikor va izotipni tanlash va salbiy nazorat.
Koimmunoprecipitatsiya nima?
Koimmunoprecipitatsiya - bu o'ziga xos antikor yordamida eritmadan buzilmagan oqsil komplekslarini cho'ktirish usuli. Koimmunoprecipitatsiya odatda ma'lum proteinga (antigen) qaratilgan ma'lum bir antikorni tanlash orqali ishlaydi, bu kattaroq oqsillar majmuasining a'zosi hisoblanadi. Ma'lum a'zoni ma'lum bir antikor bilan nishonga olib, butun protein kompleksini eritmadan tortib olish mumkin. Bu kompleksning noma'lum a'zolarini aniqlash imkonini beradi. Protein komplekslarini eritmadan tortib olish tushunchasi ba'zan "pastga tortish" mexanizmi deb ataladi.
02-rasm: B Koimmunoprecipitatsiya
Koimmunoprecipitatsiya oqsil-oqsil oʻzaro taʼsirini tahlil qilishda qoʻllaniladigan kuchli usuldir. Koimmunopresipitatsiyaning asosiy maqsadi ligandlar, kofaktorlar yoki qiziqish molekulalari kabi o'zaro ta'sir qiluvchi sheriklarni aniqlashdir. Bundan tashqari, koimmunopresipitatsiya oqsillarni sarum, hujayra lizati, gomogenlangan to'qima yoki shartli muhitdan ajratish uchun ishlatiladigan samarali usuldir.
Immunopresipitatsiya va koimmunoprecipitatsiya oʻrtasidagi oʻxshashliklar qanday?
- Immunoprecipitatsiya va koimmunoprecipitatsiya ikki turdagi yomg'ir reaktsiyasiga asoslangan texnikadir.
- Har ikkala usul ham ma'lum bir antikor orqali maqsadli antigenni aniqlash uchun ishlatilishi mumkin.
- Ikkala usul ham antigen-antikor oʻzaro taʼsiriga bogʻliq.
- Ular muntazam ravishda klinik laboratoriyalarda qoʻllaniladi.
Immunopresipitatsiya va koimmunoprecipitatsiya oʻrtasidagi farq nima?
Immunoprecipitatsiya - bu ma'lum bir antikor yordamida eritmadan oqsilni cho'ktirish usuli, koimmunoprecipitatsiya esa ma'lum bir antikor yordamida eritmadan buzilmagan oqsil komplekslarini cho'ktirish usulidir. Shunday qilib, bu immunopresipitatsiya va koimmunopresipitatsiya o'rtasidagi asosiy farqdir. Bundan tashqari, laboratoriyalarda immunopresipitatsiya ko'proq qo'llaniladi, koimmunopresipitatsiya esa laboratoriyalarda qo'llanilmaydi.
Quyidagi infografikada immunopresipitatsiya va koimmunoprecipitatsiya oʻrtasidagi farqlar yonma-yon taqqoslash uchun jadval koʻrinishida keltirilgan.
Xulosa – Immunoprecipitation va Coimmunoprecipitation
Immunoprecipitatsiya va koimmunoprecipitatsiya antigen-antikor oʻzaro taʼsiriga bogʻliq boʻlgan ikki turdagi choʻkma reaksiyasiga asoslangan texnikadir. Immunopresipitatsiya usuli ma'lum bir antikor yordamida eritmadan oqsilni cho'ktiradi, koimmunopresipitatsiya usuli esa ma'lum bir antikor yordamida eritmadan buzilmagan oqsil komplekslarini cho'ktiradi. Shunday qilib, bu immunoprecipitation va koimmunoprecipitation o'rtasidagi farqni umumlashtiradi.