Bir xamirturush gibrid va xamirturush ikki gibrid oʻrtasidagi asosiy farq shundaki, xamirturush bir gibrid DNK-oqsil oʻzaro taʼsirini tahlil qilish uchun in vitro asosidagi tahlil boʻlsa, xamirturush ikki gibrid oqsil-oqsil oʻzaro taʼsirini tahlil qilish uchun in vitro asosidagi tahlildir.
Hujayra molekulalari orasidagi oʻzaro taʼsirlarni oʻrganish genlarni ifodalash va oqsil yoʻllari bilan bogʻliq boʻlgan tanib olish joylarini aniqlashga yordam beradi. DNK va oqsil o'zaro ta'siri DNK modifikatsiyalari va transkripsiyani tartibga solish va boshqalar kabi hujayra jarayonlarining ajralmas qismidir. Boshqa tomondan, oqsil va oqsil o'zaro ta'siri replikatsiya, transkripsiya, translatsiya va signal uzatish kabi hujayra jarayonlarida muhim rol o'ynaydi. Shuning uchun hujayra molekulalarining ushbu o'zaro ta'sirini turli tahlillar orqali aniqlash juda muhimdir. Xamirturush bir gibrid va xamirturush ikkita gibrid DNK-oqsil va oqsil-oqsil o'zaro ta'sirini tahlil qilish uchun in vitro asosidagi ikkita tahlildir.
Xamirturush One gibrid nima?
Achitqi bir gibrid (Y1H) hujayra ichidagi DNK-oqsil oʻzaro taʼsirini tahlil qilish uchun in vitro asosidagi tahlildir. Bu usul birinchi marta 1993 yilda Vang va Rid tomonidan yaratilgan. O'shandan beri u biologik tadqiqotlarda katta kuch ko'rsatdi. Ushbu tahlilda ikkita asosiy komponent mavjud: DNK o'ljasi va oqsil o'ljalari.
01-rasm: Bir gibrid xamirturush
Protsedurada DNK ketma-ketligi (DNK o'ljasi) avval ikki xil muxbirning (HIS3, LacZ) yuqori oqimida klonlanadi. Ushbu reportyor konstruktsiyalari xamirturush shtammining genomiga kiritilgan. Protein o'ljalari sifatida transkripsiya omillari olinadi. Transkripsiya omillari gibrid oqsillarni hosil qilish uchun xamirturush Gal4 transkripsiya omilining transkripsiya faollashuv domeniga (AD) birlashtiriladi. Ushbu gibrid oqsil xamirturush shtammiga kiritilishidan oldin plazmidga birlashtiriladi. Rekombinant plazmid kiritilgandan so'ng, transkripsiya omili DNK fragmenti bilan o'zaro ta'sirlashganda, AD qismi reportyor gen ifodasini (HIS3 yoki LacZ) faollashtiradi. Plazmidlarning ketma-ketligi DNK fragmenti bilan bog'lanishi mumkin bo'lgan transkripsiya omilini aniqlash imkonini beradi. Yaqinda kasallik tashxisini o'rganish uchun xamirturushli gibrid usuli qo'llanildi. Shuning uchun kelajakda bu tahlil ilmiy tadqiqotlar va tibbiy muolajalarda kengroq qo'llaniladi.
Achitqi ikki gibrid nima?
Achitqi ikki gibrid (Y2H) hujayra ichidagi oqsil va oqsil oʻzaro taʼsirini tahlil qilish uchun in vitro asosidagi tahlildir. Bu usul dastlab Stenli Filds va Ok-Kyu Song tomonidan 1989 yilda topilgan. Bu usul xamirturushning Gal4 transkripsiya faktori yordamida oqsil-oqsil oʻzaro taʼsirini aniqlaydi.
02-rasm: Ikki gibrid xamirturush
Ushbu usulda birinchi navbatda ikkita termoyadroviy (gibrid) qiziqish uyg'otadigan oqsillar yordamida tuziladi: bir proteinni DNK bog'lovchi domen (DBD) bilan birlashtirish va boshqa proteinni Gal4 transkripsiya faktorining faollashtiruvchi domeni (AD) bilan birlashtirish orqali.. DBD bilan birlashtirilgan oqsil o'lja, AD bilan birlashtirilgan oqsil esa o'lja deb nomlanadi. Xamirturush shtammida o'lja va o'ljaning o'zaro ta'sirida DBD va AD reportyor genining yuqori oqimida funktsional Gal4 transkripsiya faktorini yaratish uchun yaqinlashtiriladi. Funktsional transkripsiya omili reportyor gen ifodasini faollashtiradi. Bundan tashqari, bu usul hozirda sutemizuvchilar hujayralaridagi integral membrana oqsillarining oʻzaro taʼsirini tekshirish uchun ishlatiladi.
Bir xamirturush gibrid va xamirturush ikki gibrid o'rtasidagi o'xshashliklar qanday?
- Bir achitqi gibrid va xamirturush ikkita gibrid DNK-oqsil va oqsil-oqsil oʻzaro taʼsirini tahlil qilish uchun in vitro asosidagi ikkita tahlildir.
- Bu tahlillar xamirturush shtammlaridan foydalanadi.
- Ikkala tahlil Gal4 transkripsiya faktorining faollashtirish domenidan (AD) foydalanadi.
- Oʻzaro taʼsirlarni aniqlash uchun reportyor gen (HIS3 yoki LacZ) ifodasidan foydalanadilar.
- Ularda oʻlja va oʻlja bor.
- Ikkala tahlil zamonaviy biologik tadqiqotlarda juda foydali.
Bir xamirturush gibrid va xamirturush ikki gibrid o'rtasidagi farq nima?
Achitqi bir gibrid DNK va oqsil oʻzaro taʼsirini tahlil qilish uchun in vitro asosidagi tahlil boʻlsa, xamirturush ikkita gibrid oqsil va oqsil oʻzaro taʼsirini tahlil qilish uchun in vitro asosidagi tahlildir. Shunday qilib, bu xamirturush bir gibrid va xamirturush ikki gibrid o'rtasidagi asosiy farqdir. Bundan tashqari, bitta gibrid xamirturushda o'lja DNK bo'lagi, o'lja esa oqsil molekulasidir. Boshqa tomondan, ikki gibrid xamirturushda o'lja ham, o'lja ham oqsil molekulalaridir.
Quyidagi infografikada xamirturush bir gibrid va xamirturush ikkita gibrid oʻrtasidagi farqlar jadval koʻrinishida keltirilgan.
Xulosa – xamirturush bir gibrid va xamirturush ikkita gibrid
Bir achitqi gibrid va xamirturush ikkita gibrid in vitro asosidagi ikkita muhim tahlildir. Xamirturush bir gibrid DNK va oqsil o'zaro ta'sirini tahlil qilish uchun in vitro asosidagi tahlil bo'lsa, xamirturush ikkita gibrid oqsil va oqsil o'zaro ta'sirini tahlil qilish uchun in vitro asosidagi tahlildir. Shunday qilib, bu xamirturush bir gibrid va xamirturush ikki gibrid o'rtasidagi asosiy farqdir.
