ZFN TALEN va CRISPR oʻrtasidagi asosiy farq shundaki, ZFN bu sink barmoq domeni va Fok1 endonukleaza domenidan tashkil topgan sink barmoq nukleazalariga asoslangan sunʼiy genlarni tahrirlash texnikasi. Ayni paytda, TALEN bakterial TALE oqsili va Fok1 endonukleazasidan tashkil topgan termoyadroviy oqsillarga asoslangan texnogen genlarni tahrirlash texnikasi va CRISPR ikki turdagi RNK va tegishli Cas oqsillari tomonidan boshqariladigan tabiiy RNKga asoslangan bakterial himoya mexanizmidir.
Genlarni tahrirlash vositalari ketma-ketlikka xos bogʻlanish domenlaridan va oʻziga xos boʻlmagan DNK boʻlinish modullaridan tashkil topgan ishlab chiqilgan nukleazalarga asoslangan. ZFN, TALEN va CRISPR genlarni tahrirlashning uchta turidir. ZEN va TALEN inson tomonidan yaratilgan tizimlar, CRISPR esa bakteriyalarda uchraydigan tabiiy tizimdir. Uchala tizim ham ketma-ketlikni taniydi va maqsadli DNKni ajratadi. Sink barmoq nukleazalari sink barmoq domenidan va Fok1 endonukleazidan iborat. TALENlar bakterial TALE oqsili va Fok1 endonukleazidan iborat. CRISPR ikkita RNKdan iborat (trans-aktivlashtiruvchi crRNK va bitta yo'n altiruvchi RNK).
ZFN nima?
ZFN - sink-barmoq yadrolari asosidagi genlarni tahrirlash vositasi. Sink barmoq nukleazalari - bu FokI cheklash endonukleazasining ketma-ketlikdagi o'ziga xos DNK-bog'lovchi domenlari va o'ziga xos bo'lmagan DNKni parchalovchi domenlardan tashkil topgan kimerik nukleazalar. Bu DNKda ikki zanjirli uzilishlarni keltirib chiqarish orqali keng ko‘lamli gen modifikatsiyalarini amalga oshirish imkonini beruvchi texnogen genomni tahrirlash texnologiyasi.
01-rasm: ZFN
ZFN o'simliklar va bir nechta ekin turlariga maqsadli o'zgarishlar kiritishda muhim vositadir. Bu o'simliklarga qimmatli xususiyatlarni kiritish imkonini beradi. Bundan tashqari, ZFN terapevtik salohiyatga ega, chunki u simptomlarni samarali bartaraf etish uchun aniq genetik modifikatsiyani amalga oshirishga qodir.
TALEN nima?
Transkripsiya faollashtiruvchisiga oʻxshash nukleazalar (TALEN) genlarni tahrirlash vositasi boʻlib, ZFN ga oʻxshash kimerik nukleazalarga asoslangan. Bu, shuningdek, inson tomonidan yaratilgan genomni tahrirlash texnologiyasidir. TALEN DNKda ikki zanjirli uzilishlarni keltirib chiqarish orqali gen modifikatsiyasini keltirib chiqaradi. TALENlar o'ziga xos bo'lmagan DNK bo'linish moduliga birlashtirilgan ketma-ketlikka xos DNK-bog'lovchi domenlardan iborat. Shuning uchun u TALE oqsillaridan olingan FokI boʻlinish va DNKni bogʻlovchi domenlarga ega.
02-rasm: TALEN
TALE oqsillari tabiiy ravishda Xanthomonas bakteriya jinsida uchraydi. Ushbu oqsillar 33-35 aminokislotalarning takroriy domenlaridan tashkil topgan DNKni bog'lovchi domenlarni o'z ichiga oladi. TALENning ZFNga nisbatan asosiy afzalliklaridan biri shundaki, DNK bogʻlovchi domenining bogʻlanish oʻziga xosligi TALENda 33-34 aminokislota takroriga oʻzgartirishlar kiritish orqali oʻzgartirilishi mumkin.
CRISPR nima?
CRISPR qisqartmasi Clustered Regulatory Interspaced Short Palindromic Repeats degan ma'noni anglatadi. Bu bakteriyalarda bajariladigan tabiiy RNKga asoslangan himoya mexanizmi. Aslida, bu ayniqsa viruslarga qarshi ishlatiladigan genomni tahrirlash mexanizmi. Virus yoki begona bosqinchi bakteriyalarda bu tizimni faollashtirishi mumkin. CRISPR CRISPR bilan bog'langan oqsil (Cas9) bilan birga ishlaydi.
CRISPR ikkita RNKdan iborat: trans-aktivlashtiruvchi crRNK va bitta yo'n altiruvchi RNK. Shuning uchun CRISPRning tan olinishi ushbu RNKlarning ikkalasiga bog'liq. Virusli DNK bakteriya hujayrasiga kirganda, CRISPR lokusu yo'n altiruvchi RNK hosil qiladi, u Cas oqsillarini virus DNKsiga etib borishi va bog'lanishi va ma'lum bir joyda parchalanishi uchun kuzatib boradi. Virusli DNK parchalangandan so'ng, patogen DNKning o'chirilishi tufayli u faol bo'lmaydi. Shunday qilib, CRISPR tizimi Cas oqsillari yordamida viruslarni ushlaydi, parchalaydi va faolsizlantiradi.
03-rasm: CRISPR/Cas9
CRISPR/Cas9 genomni tahrirlash tizimi sifatida ishlatiladi. Bu yangi texnologiya. Bu texnologiya juda sodda, samarali va boshqa genomni tahrirlash usullariga nisbatan tejamkor. ZFN va TALEN bilan solishtirganda, CRISPR/Cas9 tizimi maqsadli genom o'zgarishlarini induktsiya qilishda samarali vositadir.
ZFN TALEN va CRISPR oʻrtasidagi oʻxshashliklar qanday?
- ZFN, TALEN va CRISPR genlarni tahrirlash usullaridir.
- Har uchala vosita ham koʻplab kasalliklarning irsiy sabablarini tuzatishda istiqbolli usullar boʻladi.
- Biroq, ular maqsadlilik, nomukammal oʻziga xoslik va gen-maqsadlilikda cheklovlarni koʻrsatadi.
- Uchala tizim ham ikki qatorli uzilishlarga olib kelishi mumkin.
ZFN TALEN va CRISPR oʻrtasidagi farq nima?
ZFN - bu sink barmoq nukleazalariga asoslangan genni tahrirlash texnikasi, TALEN esa bakterial TALE oqsili va Fok1 endonukleazasidan tashkil topgan termoyadroviy oqsillarga asoslangan genni tahrirlash texnikasi va CRISPR tabiiy RNKga asoslangan bakterial himoya mexanizmidir. ikki turdagi RNK va bog'langan Cas oqsillari tomonidan. Demak, bu ZFN TALEN va CRISPR oʻrtasidagi asosiy farq.
Quyidagi infografikada yonma-yon taqqoslash uchun ZFN TALEN va CRISPR oʻrtasidagi farqlar jadval koʻrinishida keltirilgan.
Xulosa – ZFN va TALEN va CRISPR
ZFN, TALEN va CRISPR genlarni tahrirlash texnologiyalaridir. CRISPR - bu yaxshi samaradorlik, fizibilite va ko'p rolli klinik qo'llashni ko'rsatadigan so'nggi texnologiya. ZFN ham, TALEN ham inson tomonidan yaratilgan sun'iy vositalar, CRISPR esa bakteriyalardan himoya qilish mexanizmi. ZFN ham, TALEN ham ishlab chiqilgan nukleazalardir. CRISPR Cas oqsillari bilan bog'langan ikkita RNK turidan iborat. Shunday qilib, bu ZFN TALEN va CRISPR o'rtasidagi farqning qisqacha mazmuni.
