Kolorimetrik va florometrik tahlil oʻrtasidagi asosiy farq shundaki, kolorimetrik tahlil eritmadagi rangli birikmalar kontsentratsiyasini, florometrik tahlil esa eritmaning kinetik mexanizmini aniqlaydi.
Biokimyoviy tahlil - bu biologik molekula yoki moddaning faolligini analitik tarzda aniqlaydigan yoki miqdorini belgilaydigan usul. Bu in vitro jarayon. Kolorimetrik tahlil va florometrik tahlil laboratoriyalarda o'tkaziladigan umumiy biokimyoviy tahlillarning ikki turidir. Elishay va western blotting kabi ko'plab usullar metabolik faollikni aniqlash va oqsillar, fermentlar va boshqa kichik molekulalar kabi biomolekulalarning funktsional harakatlarini o'lchash uchun murakkab biokimyoviy tahlillardir. Ushbu turdagi tahlillar oqsil-DNK, oqsil-RNK va oqsil-oqsil o'zaro ta'sirini aniqlash uchun ishlatiladi.
Kolorimetrik tahlil nima?
Kolorimetrik tahlil - bu eritmadagi rangli birikmalar kontsentratsiyasini aniqlash usuli. Boshqacha qilib aytganda, kolorimetrik tahlil - bu reagentlar va analitlar o'rtasidagi fermentativ yoki kimyoviy reaktsiya tufayli rang o'zgarishiga olib keladigan reaktsiya. Kolorimetrik tahlillar biokimyoda fermentlar, o'ziga xos birikmalar, gormonlar, antikorlar va boshqa tahlil qiluvchi moddalarni tekshirish uchun qo'llaniladi. Ular kolorimetr yoki spektrofotometrlardan foydalanadilar. Kolorimetrlar rang xususiyatlarini ob'ektiv o'lchashni ta'minlash uchun rangli namunalarni tavsiflovchi asboblardir. Spektrofotometr yorug'likning rangi yoki to'lqin uzunligi funksiyasi sifatida yorug'lik intensivligini o'lchaydigan qurilma.
01-rasm: Kolorimetrik tahlil
Kolorimetrik tahlil qanday ishlaydi?
Kolorimetrik tahlilda quduqlarga bog'langan ma'lum bir antikor bilan plastinka tayyorlanadi. Keyin namuna qo'shiladi. Bu namunaning antikor bilan bog'lanishiga imkon berishi mumkin. Keyin aniqlovchi probi bilan reaksiyaga kirishish uchun quduqlarga aniqlovchi antikor va substrat qo'shiladi. To'xtatish eritmasi o'qishdan oldin oxirida qo'shiladi. Bo'sh deb ataladigan bo'sh quduq namunasiz qoladi. Kolorimetrik tahlilda rang qanchalik quyuqroq bo'lsa, analitning konsentratsiyasi shunchalik yuqori bo'ladi. Odatda, o'qish uchun faqat bitta to'lqin uzunligi kerak bo'ladi. Agar mos yozuvlar o'lchovi mavjud bo'lsa, ikki yoki undan ortiq to'lqin uzunligi ishlatiladi.
Ftorometrik tahlil nima?
Ftorometrik tahlil ferment reaksiyalarining kinetik mexanizmini aniqlaydigan texnikadir. Florometrik tahlil flüoresan bo'lmagan substratdan lyuminestsent mahsulot hosil bo'lishi bilan amalga oshiriladi yoki aksincha. Ushbu tahlil, shuningdek, flüoresan rezonans energiyasini uzatish (FRET) dan foydalanadi, bunda fermentativ reaksiya substratdagi ikkita ftoroforning o'rnini o'zgartirib, flüoresans intensivligini o'zgartiradi.
02-rasm: Florometrik tahlil
Ftorometrik tahlillar odatda boshqa tahlillarga qaraganda ancha sezgir. Bemorlarning toʻqima, hujayra yoki suyuqlik namunalarida diagnostik ferment bahosi uning yuqori sezuvchanligi tufayli ortadi.
Ftorometrik tahlil qanday ishlaydi?
Ftorometrik tahlilda plastinkadagi namunaga substrat qo'shiladi va lyuminestsent reaktsiyasi plastinka o'quvchi yordamida olinadi. Bu erda har bir hujayra alohida o'lchanadi. Ftorometrik tahlillarda shaffof bo'lmagan plitalar qo'llaniladi. Bu yorug'likning tarqalishini kamaytiradi. Ushbu turdagi tahlil uchun ikkita to'lqin uzunligi kerak. Bir to‘lqin uzunligi qo‘zg‘alishni aniqlash uchun, ikkinchisi esa emissiya uchun.
Kolorimetrik va florometrik tahlil oʻrtasidagi oʻxshashliklar qanday?
- Kolorimetrik tahlil va florometrik tahlil ikki xil biokimyoviy tahlildir.
- Ikkala tahlil tibbiy diagnostika uchun oʻtkaziladi.
- Bu tahlillar fermentativ reaksiyani oʻz ichiga oladi.
- Ikkala tahlilda ham substrat va analitlar mavjud.
Kolorimetrik va florometrik tahlil oʻrtasidagi farq nima?
Kolorimetrik tahlil - bu eritmadagi rangli birikmalar konsentratsiyasini aniqlash usuli, florometrik tahlil esa ferment reaktsiyalarining kinetik mexanizmini aniqlaydigan texnikadir. Shunday qilib, bu kolorimetrik va florometrik tahlil o'rtasidagi asosiy farq. Bundan tashqari, florometrik tahlillar kolorimetrik tahlillarga qaraganda sezgirroq; shunday qilib, florometrik tahlillar ko'proq tahlil qiluvchi moddalarni aniqlash qobiliyatiga ega. Shunday qilib, bu kolorimetrik va florometrik tahlil o'rtasidagi yana bir muhim farq. Bundan tashqari, florometrik tahlillar ikkita to'lqin uzunligini talab qiladi, kolorimetrik tahlillar esa bitta to'lqin uzunligi bilan amalga oshiriladi.
Quyidagi infografikada kolorimetrik va florometrik tahlil oʻrtasidagi koʻproq farqlar berilgan.
Xulosa – Kolorimetrik va Florometrik tahlil
Biokimyoviy tahlil hujayradagi metabolik reaktsiyalarni aniqlash va miqdorini aniqlash uchun ishlatiladigan analitik jarayondir. Kolorimetrik tahlil va florometrik tahlil biokimyoviy tahlillarning ikki turidir. Kolorimetrik tahlil - bu reagentlar va analitlar o'rtasidagi fermentativ yoki kimyoviy reaktsiya natijasida rang o'zgarishiga olib keladigan reaktsiya, florometrik tahlil esa ferment reaktsiyalarining kinetik mexanizmini aniqlash uchun ishlatiladigan usuldir. Ikkala tahlil ham substrat va analitni o'z ichiga olgan fermentativ reaktsiyaga bog'liq. Florometrik tahlillar kolorimetrik tahlillarga qaraganda sezgirroq. Eng muhimi, florometrik tahlillar ikkita to'lqin uzunligini talab qiladi, kolorimetrik tahlillar esa faqat bitta to'lqin uzunligi bilan amalga oshirilishi mumkin. Shunday qilib, bu kolorimetrik va florometrik tahlil o'rtasidagi farqni umumlashtiradi.
