Elektroporatsiya va mikroin'ektsiya o'rtasidagi asosiy farq shundaki, elektroporatsiya DNKni xost hujayralariga etkazib berish uchun yuqori kuchlanishli elektr impulsidan foydalanadigan usul, mikroin'ektsiya esa DNKni ichiga yuborish uchun nozik uchli shisha igna yoki mikropipetdan foydalanadigan usuldir. xost hujayralari.
Transformatsiya - bu begona DNKning xost hujayralariga o'tkazilishi jarayoni. Transformatsiya orqali organizmning genetik tarkibini o'zgartirish mumkin. Turli xil kimyoviy, biologik va fizik transformatsiya usullari mavjud. Ba'zilari to'g'ridan-to'g'ri usullar, ba'zilari esa bilvosita usullardir. Elektroporatsiya va mikroin'ektsiya to'g'ridan-to'g'ri transformatsiya usullari bo'lgan ikkita jismoniy usuldir. Elektroporatsiya DNKni xost hujayralariga kiritish uchun biologik hujayra membranalarida mikroskopik teshiklarni qo'zg'atish uchun elektr maydonidan foydalanadi. Mikroin'ektsiya esa mikropipet yoki nozik uchli shisha igna yordamida to'g'ridan-to'g'ri DNKni etkazib beradi.
Elektroporatsiya nima?
Elektroporatsiya - bu DNKni o'simlik hujayralari va protoplastlarga etkazib beradigan transformatsiya usuli. Ushbu texnikada yuqori kuchlanishli elektr impuls ishlatiladi. O'simlik materiallari DNKga ega bufer eritmasida inkubatsiya qilinadi. Keyin eritma yuqori kuchlanishli elektr impulsiga ta'sir qiladi. O'simlik hujayralari membranalarida yuqori kuchlanishli induktsiyali teshiklar hosil bo'ladi va bu teshiklar orqali DNK hujayralar ichida ko'chib o'tadi va o'simlik genomik DNKsi bilan birlashadi. Bu usulning samaradorligi o'simlik materiallari va davolash sharoitlariga bog'liq.
01-rasm: Elektroporatsiya
Transformatsiya elektroporatsiya yordamida amalga oshirilganda, hujayralarning atigi 40-50% DNKni oladi. Bundan tashqari, bu usulda o'zgartirilgan hujayralarning atigi 50% omon qolishi mumkin. Biroq, bu usulni bajarish oson va hujayralarning biologik tuzilishi yoki funktsiyasini o'zgartirmaydi. Bundan tashqari, u keng doiradagi hujayralar uchun ishlatilishi mumkin.
Mikroinjeksiyon nima?
Mikroin'ektsiya - bu katta hujayralarga DNKni kiritishda ayniqsa foydali bo'lgan transformatsiya usuli. Bu usul DNKni o'simlik protoplastlari yoki hayvonlar hujayralariga (oositlar, tuxumlar va embrionlar) etkazish uchun nozik uchli shisha igna yoki mikropipetdan foydalanadi. Aslida, bu usul sichqonlar kabi transgen hayvonlarni yaratish uchun ko'proq mos keladi. Bu usulda DNK bevosita yadro yoki sitoplazmaga kiritiladi.
Elektrporatsiyaga o'xshab, mikroin'ektsiya to'g'ridan-to'g'ri transformatsiya usulidir. Mikroin'ektsiya maxsus mikroskop sozlamalari ostida amalga oshiriladi. Pipetka, igna, mikroskop bosqichi va video texnologiyasini ushlab turishning kompyuterlashtirilgan nazorati ushbu texnikaning samaradorligini oshirdi. DNKni in'ektsiya qilishda, o'zgartirilgan hujayralarni osongina aniqlash uchun bo'yoq ishlatilishi mumkin. Shuning uchun o'zgartirilgan hujayralarni aniqlash uchun alohida usuldan foydalanishning hojati yo'q. Eng muhimi, mikroinyeksiya jarayoni marker genini talab qilmaydi.
02-rasm: Mikroinyeksiya
Bundan tashqari, bu usul juda samarali va takrorlanishi mumkin. Biroq, bu usul qimmat, vaqt talab qiladi va malakali mutaxassislarni talab qiladi. Bundan tashqari, bu usul bilan faqat oz sonli hujayralarni davolash mumkin.
Elektroporatsiya va mikroinyeksiya oʻrtasidagi oʻxshashliklar qanday?
- Elektrporatsiya va mikroin'ektsiya ikki turdagi transformatsiya texnikasidir.
- Bu usullar DNKni oʻsimlik hujayralari va protoplastlarga yetkazib beradi.
- Bular bevosita usullardir.
- Bundan tashqari, ular fizik yoki mexanik usullardir.
- Har ikki usul ham transgen oʻsimliklar va hayvonlarni ishlab chiqarishda yordam beradi.
Elektroporatsiya va mikroinyeksiya oʻrtasidagi farq nima?
Elektroporatsiya texnikasi DNKni kiritish uchun elektr maydonidan foydalanadi, mikroin'ektsiya usuli esa DNKni kiritish uchun mikropipet yoki nozik uchli shisha ignadir. Shunday qilib, bu elektroporatsiya va mikroin'ektsiya o'rtasidagi asosiy farq. Bundan tashqari, elektroporatsiya asosan o'simlik hujayralari va protoplastlar uchun, mikroin'ektsiya esa hayvonlar hujayralari uchun qo'llaniladi. Bundan tashqari, elektroporatsiya mikroin'ektsiya kabi ko'p vaqt talab qilmaydi.
Quyidagi infografikada elektroporatsiya va mikroinyeksiya oʻrtasidagi farq jadval koʻrinishida jamlangan.
Xulosa – Elektroporatsiya va mikroinjeksiyon
Elektroporatsiya va mikroin'ektsiya genlarni uzatishning ikkita fizik usulidir. Elektroporatsiya yuqori kuchlanishli elektr maydonidan foydalanadi, mikroin'ektsiya shisha igna yoki mikropipetdan foydalanadi. Shunday qilib, bu elektroporatsiya va mikroin'ektsiya o'rtasidagi asosiy farq. Biroq, ikkala usul ham ekzogen DNKni xost hujayralariga bevosita kiritadi.
