Izokratik va gradientli elyusiya oʻrtasidagi asosiy farq shundaki, izokratik elyusiya mobil fazada doimiy kontsentratsiyani saqlab turishni bildiradi, gradient elutsiya esa mobil fazada oʻzgaruvchan kontsentratsiyani saqlashni bildiradi.
Xromatografiyada izokratik va gradient elyusiya atamalaridan foydalaniladi. Xromatografik yugurishda biz harakatlanuvchi faza, harakatlanuvchi modda bilan birga harakatsiz modda bo'lgan statsionar fazadan foydalanamiz. Izokratik va gradientli elyusiya mobil fazaning xususiyatlarini tavsiflaydi.
Izokratik elyusiya nima?
Isokratik elutsiya - bu xromatografiyada harakatlanuvchi faza doimiy konsentratsiyaga ega bo'lganda qo'llaniladigan atama. Bu erda harakatlanuvchi fazaning konsentratsiyasi butun xromatografik jarayon davomida doimiy bo'ladi. Ushbu jarayonda biz xromatogrammada ushlab turish vaqti bilan chiziqli ravishda ortib borayotgan cho'qqi kengligini kuzatishimiz mumkin. Biroq, bu ahvolga tushib qoladi - kech elutsiya uchun kechikish cho'qqilari juda tekis va keng bo'ladi. Shuning uchun bu keng cho‘qqilarni cho‘qqi deb tan olish qiyin bo‘ladi.
Bundan tashqari, izokratik elyusiyada selektivlik ustun oʻlchamlariga qarab oʻzgarmaydi. Bu shuni anglatadiki, selektivlik ustun o'lchamlaridagi o'zgarishlarga bog'liq emas. Bu erda uzunlik va diametr ustun o'lchamlari sifatida qabul qilinadi. Shuning uchun cho'qqilar bir xil tartibda elute qilinadi.
Gradient Elyusiya nima?
Gradient elutsiya xromatografiyada qoʻllaniladigan atama boʻlib, bu yerda harakatlanuvchi faza oʻzgaruvchan konsentratsiyaga ega boʻladi. Boshqacha qilib aytganda, mobil fazaning konsentratsiyasi doimiy bo'lib qolishi shart emas. Misol uchun, HPLCda keng tarqalgan ajratish usuli metanol 10% dan dastlab foydalanadi va 90% da tugaydi, konsentratsiyani asta-sekin oshirib boradi. Mobil faza ikki komponentdan iborat: kuchsiz erituvchi va kuchli erituvchi. Kuchsiz erituvchi erigan moddaning sekin suzilishiga imkon beradi, kuchli erituvchi esa erigan moddaning tez surilishiga olib keladi. Teskari fazali xromatografiyada kuchsiz erituvchi sifatida suvdan, kuchli erituvchi sifatida esa organik erituvchidan foydalanamiz.
01-rasm: HPLC
Bundan tashqari, gradientli elutsiya usuli keyinchalik elutsiya qilinadigan komponentlarni tezroq elimitatsiya qilish uchun kamaytiradi va xromatogrammada tor tepalikni beradi. Bu usul cho'qqi shakli va cho'qqi balandligini ham yaxshilaydi. Bundan tashqari, gradient elutsiya texnikasida elutsiya tartibi ustun o'lchamlari o'zgarishi bilan o'zgaradi.
Izokratik va gradient elyusiya oʻrtasidagi farq nima?
Xromatografiyada izokratik va gradient elyusiya atamalaridan foydalaniladi. Izokratik va gradient elyusiya mobil fazaning xususiyatlarini tavsiflaydi. Izokratik va gradient elyusiya o'rtasidagi asosiy farq shundaki, izokratik elyusiya mobil fazada doimiy kontsentratsiyani saqlashni bildiradi, gradient elutsiya esa mobil fazada o'zgaruvchan kontsentratsiyani saqlashni anglatadi.
Izokratik elutsiya texnikasida cho'qqi kengligi ushlab turish vaqti bilan chiziqli ravishda ortadi. Shu bilan birga, gradient elutsiya texnikasida, keyinroq elutsiya qilinadigan komponentlarning saqlanishi kamayadi, shuning uchun elutsiya tezroq bo'ladi va tor cho'qqilarni beradi. Bundan tashqari, izokratik elyusiyada selektivlik ustun oʻlchamiga bogʻliq emas, lekin gradient elyusiyasida selektivlik ustun oʻlchamlari oʻzgarishi bilan oʻzgaradi.
Quyidagi jadvalda izokratik va gradient elyusiya oʻrtasidagi farq jamlangan.
Xulosa – Isocratic vs Gradient Elution
Isokratik elyusiya va gradient elyusiyasi mobil fazaning xususiyatlarini tavsiflaydi. Izokratik va gradient elyusiya o'rtasidagi asosiy farq shundaki, izokratik elyusiya mobil fazada doimiy kontsentratsiyani saqlashni bildiradi, gradient elutsiya esa mobil fazada o'zgaruvchan kontsentratsiyani saqlashni anglatadi.
