Asosiy farq – HPLC va HPTLC
HPLC va HPTLC oʻrtasidagi asosiy farq shundaki, HPLC namunadagi komponentlarni miqdoriy ajratish imkonini beradi, HPTLC esa namunadagi komponentlarni miqdoriy ajratishga ruxsat bermaydi.
Xromatografiya - bu aralashmaning tarkibiy qismlarini ajratish va aniqlash uchun ishlatiladigan fizik ajratish usuli. HPLC ham, HPTLC ham xromatografik usullardir. HPLC yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasidir. HPTLC yuqori samarali yupqa qatlamli xromatografiya.
HPLC nima?
HPLC - yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi. Bu aralashmaning tarkibiy qismlarini ajratish, aniqlash va miqdorini aniqlash uchun ishlatiladigan analitik texnikadir. Ushbu texnikada namuna mos erituvchida eritiladi. Keyin namuna bilan erituvchi berilgan bosimga ega nasosdan o'tkaziladi. Nasos qattiq adsorbent moddasi bilan to'ldirilgan. Keyin ba'zi komponentlar changni yutish materialiga kuchli bog'lanadi, boshqa komponentlar esa erkin bog'lanadi. Bu komponentlarning nasos orqali turli oqim tezligiga ega bo'lishiga olib keladi. Shuning uchun komponentlarni osongina ajratish mumkin.
01-rasm: HPLC tizimi
Nasosni to'ldiruvchi adsorbent moddasi statsionar faza deb nomlanadi. Eritilgan namunaga ega erituvchi mobil faza deb nomlanadi. Ushbu texnikada ishlatiladigan nasos ustun deb ataladi. Ustun adsorbent material bilan to'ldirilgan, ko'pincha silika zarralari. Ushbu zarrachalarning o'lchami 2-50 mkm gacha bo'lishi mumkin. Ajratish jarayoniga mobil fazaning tarkibi va tizimning harorati ta'sir qiladi. Statsionar faza va namunadagi komponent o'rtasidagi o'zaro ta'sirlar hidrofobik o'zaro ta'sirlar, dipol-dipol o'zaro ta'sirlar, ionli bog'lanishlar va boshqalar bo'lishi mumkin.
HPLC ning ish bosimi an'anaviy suyuqlik xromatografiyasiga qaraganda ancha yuqori. U 50-350 bar atrofida yotadi. Suyuq xromatografiya va HPLC o'rtasidagi farq shundaki, suyuq xromatografiyada namuna tortishish ostida ustundan tushadi, HPLCda esa namuna ustun orqali bosim ostida bo'ladi. An'anaviy suyuqlik xromatografiyasi bilan solishtirganda ustunning o'lchami va changni yutish zarralari ham juda kichik. Biroq, HPLC texnikasi tomonidan berilgan piksellar soni yuqori.
HPTLC nima?
HPTLC - yuqori samarali yupqa qatlamli xromatografiya. Bu an'anaviy TLC ning ilg'or va avtomatlashtirilgan shakli. Ushbu texnika qisqa vaqt ichida samarali rezolyutsiyani ta'minlaydi. Ushbu tahlil usulida namuna va ma'lumotnoma bir vaqtning o'zida tahlil qilinishi mumkin, bu esa namunani mos yozuvlar bilan taqqoslash imkonini beradi. Bu boshqa xromatografik usullarga qaraganda yaxshilangan analitik aniqlikni beradi. Tahlil qilish uchun vaqt kamroq. Texnika arzon texnika hisoblanadi.
02-rasm: HPTLC yordamida oziq-ovqat bo'yoqlarining tahlili
HPTLC usuli oddiy jarayon bo'lib, namuna tayyorlash bosqichi ham yo'q qilinadi (An'anaviy TLCda namuna tayyorlash bosqichi ajratishdan oldin kiritiladi. Bu bosqich tozalash va boyitishni o'z ichiga oladi). Erituvchidan hech qanday dastlabki ishlov berishsiz bevosita foydalanish mumkin, ammo boshqa xromatografik usullar gazsizlantirish, filtrlash va hokazolar kabi dastlabki ishlov berishni talab qiladi.
HPTLCda ishlatiladigan adsorbent material juda kichik zarracha o'lchamiga ega bo'lgan kremniydir. An'anaviy TLCda kremniyning zarracha hajmi 5-20 mkm, HPTLCda esa 4-8 mkm. Namuna aplikator yordamida HPTLC plastinkasiga qo'llaniladi. Bu yagona va xavfsiz dasturni beradi. Keyin plitalar mobil fazaga ega bo'lgan kameraga joylashtiriladi. Kamera mobil fazaning bug 'bilan to'yingan bo'lishi kerak. HPTLC jarayonidan so'ng, ko'chirilgan dog'larni aniqlash mumkin. Plitadagi dog'larni aniqlashda HPTLC texnikasi mos keladigan UV mintaqasi yoki yod kamerasidan foydalanadi.
HPLC va HPTLC o'rtasidagi farq nima?
HPLC va HPTLC |
|
| HPLC yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi. | HPTLC - yuqori samarali yupqa qatlamli xromatografiya. |
| Texnika | |
| HPLCda erituvchi bilan harakatlanuvchi faza statsionar faza bilan to'ldirilgan ustun orqali o'tkaziladi. | HPTLCda namuna TLC plastinkasida ko'rinadi va mobil fazani o'z ichiga olgan kamera ichiga joylashtiriladi; keyin namunaga mobil faza bilan birga plastinka bo‘ylab yuqoriga ko‘chishiga ruxsat beriladi. |
| Oʻlchov | |
| HPLCda komponentlarning ustun boʻylab oqim tezligi oʻrtasidagi farqlar namunadagi komponentlarni ajratish uchun ishlatiladi. | HPTLCda namunadagi har bir komponent bosib oʻtgan masofalar orasidagi farq namunadagi komponentlarni ajratish uchun ishlatiladi. |
| Miqdoriy ajratish | |
| HPLC namunadagi komponentlarni miqdoriy ajratish imkonini beradi. | HPTLC namunadagi komponentlarni miqdoriy ajratishga ruxsat bermaydi. |
Xulosa – HPLC va HPTLC
HPLC va HPTLC ikkita xromatografik texnikadir. HPLC va HPTLC o'rtasidagi asosiy farq shundaki, HPLC namunadagi komponentlarni miqdoriy ajratish imkonini beradi, HPTLC esa namunadagi komponentlarni miqdoriy ajratishga ruxsat bermaydi.
