HEK293 va HEK293t oʻrtasidagi asosiy farq shundaki, HEK293 inson embrion buyragidan olingan oʻlmas hujayra chizigʻi boʻlib, 5DNK turi kesilgan inson adenovirusi bilan transfektsiya qilinadi, HEK293t esa HEK293 asl hujayra liniyasidan olingan qiz hujayra liniyasidir. replikatsiya kelib chiqishi SV40 ga ega bo'lgan plazmid vektor bilan transfektsiyalangan.
Transfeksiya odatda hujayralarga ularning genotipi va fenotipiga ta'sir qilish uchun begona DNK va RNKni kiritish jarayoni sifatida aniqlanadi. Chet el nuklein kislotalarining turli biologik, kimyoviy va fizik usullar bilan kiritilishi hujayraning xususiyatlarini o'zgartirishi mumkin. Oxir-oqibat, bu hujayra kontekstida gen funktsiyasi va oqsil ifodasini o'rganish imkonini beradi. HEK293 va HEK293t ikki hujayra liniyasi bo'lib, ular transfeksiyaga moyilligi tufayli ko'p yillar davomida hujayra biologiyasi tadqiqotlarida keng qo'llanilgan.
HEK293 nima?
HEK293 - embrion inson buyragidan olingan o'lmas hujayra liniyasi bo'lib, u ko'plab rekombinant oqsillarni ishlab chiqarish uchun kesilgan inson adenovirusi 5DNK bilan transfektsiya qilinadi. HEK293s dastlab 1973 yilda golland biologi Aleks Van der Eb tomonidan inson buyragi hujayralaridan ajratilgan. Bu hujayralar ayol homilaning to'qima madaniyatida o'stirilgan. Keyinchalik ular Van der Eb laboratoriyasining doktorlik ilmiy xodimi Frenk Grem tomonidan kesilgan inson adenovirusi turi 5DNK bilan transfeksiya qilindi. Bu hujayra qatori HEK293 deb nomlandi, chunki u Frankning 293rd tajribasi edi.
01-rasm: HEK293
Adenovirus genlarining HEK hujayra genomiga kiritilishi bu hujayralarga yuqori miqdorda rekombinant oqsillarni juda samarali ishlab chiqarish imkonini beradi. Bundan tashqari, adenovirus vektorida CMV promouter mintaqasi mavjud; demak, bu samaradorlikni yanada oshiradi. Ushbu hujayra liniyasi gen ekspressiyasini o'rganish uchun xost sifatida ishlatilgan. Ushbu hujayra liniyasi biotexnologiya sanoati tomonidan gen terapiyasi uchun terapevtik oqsillarni ishlab chiqarish uchun ham ishlatiladi.
HEK293t nima?
HEK293t - HEK293 asl hujayra chizig'idan olingan qiz hujayra liniyasi bo'lib, u ko'p miqdorda rekombinant oqsillarni ishlab chiqarish uchun replikatsiya kelib chiqishi SV40 bo'lgan plazmid vektor bilan transfektsiya qilinadi. HEK293t - bu SV40 katta T antigenining mutant versiyasini ifodalovchi inson hujayra liniyasi. HEK293t Mishel Karlosning Stenforddagi laboratoriyasida HEK29E hujayra liniyasini SV40 katta T antigenining haroratga sezgir mutantini kodlovchi plazmid bilan barqaror transfeksiyasi orqali yaratilgan. U dastlab 293/tsA1609neo deb nomlangan. Buning sababi shundaki, transfeksiya neomitsinga chidamliligini va SV40 katta T antigenining tsA 1609 allelini ifodalovchi hujayra chizig'ini yaratish uchun ishlatilgan.
02-rasm: HEK293t
SV40 katta T antigenining mutant versiyasini ifodalash tufayli replikatsiya kelib chiqishi SV 40 bo'lgan transfektsion plazmidlar rekombinant oqsil miqdorini sezilarli darajada oshirishi mumkin. Bu hujayra liniyasi odatda biotexnologiya sanoatida oqsillarni ifodalash va rekombinant retroviruslarni ishlab chiqarish uchun ishlatiladi.
HEK293 va HEK293t oʻrtasidagi oʻxshashliklar qanday?
- HEK293 va HEK293t transfeksiyaga moyilligi tufayli hujayra biologiyasi tadqiqotlarida keng qoʻllanilgan ikkita hujayra qatoridir.
- Har ikkala hujayra qatori laboratoriyadan olingan.
- Bu hujayralar rekombinant oqsil ishlab chiqarish miqdorini sezilarli darajada oshirishi mumkin.
- Ular embrion inson buyragi hujayralarini plazmid vektor bilan transfeksiya qilish orqali hosil boʻladi.
HEK293 va HEK293t oʻrtasidagi farq nima?
HEK293 insonning embrion buyragidan olingan, 5DNK turi kesilgan inson adenovirusi bilan transfektsiyalangan o'lmas hujayra liniyasidir. Bundan farqli o'laroq, HEK293t - HEK293 asl hujayra chizig'idan olingan, SV40 replikatsiyasining kelib chiqishini tashuvchi plazmid vektori bilan transfektsiyalangan hujayra liniyasi. Shunday qilib, bu HEK293 va HEK293t o'rtasidagi asosiy farq. Bundan tashqari, HEK293 SV40 katta T antijenining mutant versiyasini ifodalamaydi. Boshqa tomondan, HEK293t SV40 katta T antigenining mutant versiyasini ifodalaydi.
Quyidagi infografikada yonma-yon taqqoslash uchun HEK293 va HEK293t oʻrtasidagi farqlar jadval koʻrinishida keltirilgan.
Xulosa – HEK293 va HEK293t
HEK293 va HEK293t - barqaror o'sishi va transfeksiyaga moyilligi tufayli hujayra biologiyasi tadqiqotlarida keng qo'llaniladigan ikkita hujayra liniyasi. HEK293 kesilgan inson adenovirusi turi 5DNK bilan transfektsiyalangan embrion inson buyragidan olingan o'lmas hujayra liniyasi bo'lsa, HEK293t esa HEK293 asl hujayra chizig'idan olingan qiz hujayra liniyasi bo'lib, replikatsiya kelib chiqishi SV40ni olib yuruvchi plazmid vektori bilan transfektsiya qilinadi. Shunday qilib, bu HEK293 va HEK293t o'rtasidagi farqni umumlashtiradi.
