Klenow fragmenti va DNK polimeraza 1 o'rtasidagi asosiy farq shundaki, Klenow fragmenti DNK polimeraza 1 ning katta qismi bo'lib, u 5' dan 3' gacha ekzonukleaza faolligiga ega emas, DNK polimeraza esa E. coli fermenti bo'lib, uchtasi ham mavjud. domenlar, shu jumladan 5′ dan 3′ gacha ekzonukleaz faolligi.
DNK polimeraza tirik organizmlarda DNK replikatsiyasida ishtirok etadigan asosiy fermentlardan biridir. Eukaryotlar va prokaryotlarda DNK polimeraza fermentining o'lchami va shakliga qarab turli shakllari mavjud. DNK polimeraza 1, 2 va 3 faqat prokaryotik organizmlarda bo'ladi va ular DNK replikatsiyasida turli rol o'ynaydi. DNK polimeraza 1 5 dan 3 gacha polimeraza, 3 dan 5 gacha ekzonukleaza faolligiga va 5 dan 3 gacha ekzonukleaza faolligiga ega uchta domenga ega. Klenow fragmenti DNK polimeraza 1 ning proteolitik mahsulotidir. Bu DNK polimeraza 1ning 5-3' polimeraza va 3'-5' ekzonukleaza faolligiga ega, lekin 5'-3' eksonukleaza faolligiga ega emas.
Klenow fragmenti nima?
Klenow fragmenti DNK polimeraza 1 ning katta qismidir. DNK polimeraza 1 dan farqli o'laroq, Klenow fragmentida 5′ dan 3′ gacha ekzonukleaza faolligi ko'rinmaydi, chunki unda 5′ dan 3′ oldinga eksonukleaza domeni yo'q. Klenow parchalari DNK polimeraza 1 ni oqsilni hazm qiluvchi ferment bo'lgan subtilisin deb ataladigan proteaza bilan hazm qilish orqali hosil bo'ladi. Ba'zi ilovalarda Klenow fragmentining 3' dan 5' eksonukleaza faolligi istalmagan bo'ladi. Uni Klenow fragmentini kodlaydigan genga mutatsiya kiritish orqali olib tashlash mumkin. Olingan ferment faqat 5-3' polimeraza faolligiga ega bo'lgan ferment ekzo-Klenow fragmenti deb nomlanadi. Morfologik jihatdan Klenow parchasi insonning o'ng qo'liga o'xshaydi. U N-terminal 3'-5' ekzonukleaza domeni va taxminan 30 A bilan ajratilgan C-terminal polimeraza domeniga ega.
01-rasm: Klenow fragmenti va DNK polimeraza 1
Klenow fragmenti molekulyar biologik texnikada muhim vositadir. Klenow fragmentlari bir nechta foydalanishga ega. Ular to'mtoq bo'laklarni ishlab chiqarish uchun to'mtoq uchli klonlashda juda muhimdir. Klenow bo'laklari 3' o'simtalarni olib tashlashi yoki to'mtoq uchlarini hosil qilish uchun 5' o'simtalarni to'ldirishi mumkin. Bundan tashqari, Klenow fragmentlari ikkita zanjirli DNKni bitta ipdan sintez qilish uchun ishlatiladi. Bundan tashqari, ular 5'dan 3' gacha DNKga bog'liq DNK polimeraza faolligidan foydalangan holda radioaktiv yorliqli zondlarni tayyorlash uchun ishlatiladi.
DNK polimeraza 1 nima?
DNK polimeraza 1 (Pol 1) bakterial DNK replikatsiyasi uchun zarur bo'lgan prokaryotlarda topilgan fermentdir. Bu 1956 yilda Artur Kornberg tomonidan kashf etilgan birinchi DNK polimeraza turidir. Pol 1 E. coli tarkibida eng ko'p bo'lgan polimerazadir. U gen polA tomonidan kodlangan va 928 aminokislotadan iborat. U uchta domendan iborat. Uchala domen ham alohida funktsiyalarni bajaradi. Ikki domen 5′ dan 3′ gacha ekzonukleaza faolligini va 3′ dan 5′ gacha ekzonukleaza faolligini amalga oshiradi. Pol 1 ga ega bo'lgan ushbu faollik tufayli u DNKni replikatsiya qiluvchi ferment emas, balki DNKni tuzatuvchi ferment sifatida mashhur. Uchinchi domen DNK shablonini chiqarishdan oldin bir nechta polimerizatsiyani (5′ dan 3′ gacha) katalizlash qobiliyatiga ega va yangi DNKni to'ldirish va RNK primerlarini olib tashlash orqali Okazaki fragmentlarini bir-biriga bog'laydi.
02-rasm: DNK polimeraza
E Coli-dan ajratilgan Pol 1 molekulyar ilovalarda keng qo'llanilgan. Biroq, Taq Polimeraza kashf etilgandan so'ng, u PCR texnologiyasida E Coli Pol 1 o'rnini egalladi. Taq polimeraza Pol 1 ga tegishli termostabil DNK polimeraza turidir.
Klenow fragmenti va DNK polimeraza 1 o'rtasidagi o'xshashliklar qanday?
- Klenow fragmenti DNK polimeraza 1 ning katta qismidir.
- Ular 5-3' DNKga bog'liq DNK polimeraza faolligi va 3'-5' ekzonukleaza faolligiga ega bo'lib, ular tekshirishda vositachilik qiladi.
- Ular bir nechta maqsadlarda ishlatiladi.
Klenow fragmenti va DNK polimeraza 1 o'rtasidagi farq nima?
Klenow fragmenti va DNK polimeraza 1 o'rtasidagi asosiy farq shundaki, Klenow fragmentida 5' dan 3' gacha ekzonukleaza faolligi yo'q, DNK polimeraza 1 esa 5' dan 3' gacha ekzonukleaza faolligiga ega. Shuning uchun Klenow fragmenti ikkita domenga ega, DNK polimeraza 1 esa uchta domenga ega.
Quyida infografikada Klenow fragmenti va DNK polimeraza 1 oʻrtasidagi farq haqida batafsil maʼlumot berilgan.
Xulosa – Klenow fragmenti va DNK polimeraza 1
DNK polimeraza 1 E. coli fermenti boʻlib, u 5′ dan 3′ gacha polimerlanish domeni, 3′ dan 5′ gacha ekzonukleaza domeni va 5′ dan 3′ gacha ekzonukleaza domeni kabi uchta domenga ega. Klenow fragmenti DNK polimerazasining katta qismidir. Unda DNK polimeraza 1 ning bitta domeni yo'q, bu 5' dan 3' eksonukleaza domenidir. Klenow fragmenti va DNK polimeraza 1 o'rtasidagi asosiy farq shundaki, Klenow fragmentlari 5′ dan 3′ gacha ekzonukleaza domeniga ega emas, DNK polimeraza 1 esa 5′ dan 3′ eksonukleaza domeniga ega.
