Asosiy farq – kapillyar elektroforez va jel elektroforez
Elektroforez - zarracha zaryadi, zarracha hajmi va zarracha shakliga qarab biomolekulalarni ajratish uchun ishlatiladigan usul. Elektroforetik harakatchanlik deb nomlanuvchi molekulaning migratsiyasi ishlatiladigan polimer/jel turiga, uning g'ovak hajmiga, ta'minlangan kuchlanishga, ish vaqtiga va sirtning hajmga nisbatiga bog'liq. Amaldagi biomolekula turiga qarab elektroforez usullarining har xil turlari mavjud. Ixtiro qilingan elektroforezning birinchi turi qog'oz elektroforez bo'lib, unda biomolekulalarni ajratish uchun vosita sifatida nitroselüloz qog'oz ishlatilgan. Biomolekulalarni ajratish uchun turli xil teshik o'lchamdagi jellar ishlatilgan jel elektroforez printsipi keyinchalik ixtiro qilingan. Jel elektroforez texnikasi texnikaning aniqligini oshirish uchun yanada o'zgartirildi va bunday modifikatsiyalardan biri kapillyar elektroforezdir. Kapillyar elektroforez va jel elektroforez o'rtasidagi asosiy farq shundaki, gel elektroforezi vertikal yoki gorizontal tekislikda standart gözenek o'lchamidagi polimer jeli yordamida amalga oshiriladi, kapillyar elektroforez esa polimer suyuqligi yoki jel bilan kapillyar naychada amalga oshiriladi.
Gel elektroforez nima?
Gel elektroforezi asosan nuklein kislotalar, oqsillar yoki aminokislotalarni zaryadi, hajmi va shakliga qarab ajratish uchun ishlatiladigan usuldir. Ushbu usulda ajratish vositasi sifatida polimer moddasi bo'lgan jismoniy jel ishlatiladi. Eng ko'p ishlatiladigan jellar agaroza (nuklein kislotalarni ajratish uchun) va poliakrilamid (oqsillarni ajratish uchun). Jel elektroforetik apparati jelni tayyorlash uchun jel quyish patnisini, quduqlarni tayyorlash uchun quyma taroqlarni, bufer tankini, elektrodlarni - musbat (anod) va salbiy (katod) va kuchlanish ta'minoti blokini o'z ichiga oladi. DNK yoki RNK kabi manfiy zaryadlangan molekulalar katoddan anodga, musbat zaryadlangan molekulalar esa aksincha harakat qiladi. Jel tayyorlash talabga muvofiq amalga oshiriladi. Agar yuqori aniqlik yoki molekulalarni ajratish kerak bo'lsa, kichikroq gözenek hajmiga ega yuqori konsentratsiyali jelni tayyorlash kerak. Jel matritsasida ajratilgan molekulalar bo'yash texnikasidan so'ng kuzatiladi. Ajratilgan molekulalar jel matritsasida tasma shaklida ko'rinadi.
01-rasm: Gel elektroforez
Gel elektroforezi molekulyar diagnostikada DNK barmoq izlari kabi ma'lum bir DNK/RNK fragmenti yoki oqsil mavjudligini aniqlash uchun ishlatiladi. Jel elektroforez, shuningdek, olingan biomolekula namunasining tozaligini aniqlaydi. Jel elektroforezi kirish va duragaylashning dastlabki bosqichi va ketma-ketlikdan keyin tasdiqlovchi tahlil sifatida amalga oshiriladi.
Kapilyar elektroforez nima?
Kapillyar elektroforez jel elektroforezining modifikatsiyasi boʻlib, u molekulaning zaryadiga, hajmiga qarab bir xil ajratish printsipidan foydalanadi, lekin kapillyar naychada jel moddasi yoki suyuq polimer bilan amalga oshiriladi. Kapillyarlar eritilgan kremniydan tayyorlanadi va har bir kapillyar naychaning ichki diametri 50-100 mkm va uzunligi 25-100 sm. Namunalar polimer moddasini o'z ichiga olgan kapillyar naychaga yuboriladi va an'anaviy gel elektroforeziga qaraganda ancha tez ajratiladi. Kapillyar tizim namunani har qanday ifloslanishdan himoya qiluvchi izolyator ko'ylagi ichida yaxshi himoyalangan. Kapillyarlar gidroksietil tsellyuloza kabi suyuq polimerlar yoki poliakrilamid kabi yuqori aniqlikdagi jellar bilan to'ldirilishi mumkin. Kapillyar elektroforez ko'proq ruxsat beradi; shuning uchun ajratish aniqroq. Kapillyar elektroforez spektrofotometrik tahlil orqali avtomatlashtirilgan detektor tizimidan foydalanadi. Buning sababi yuqori sirt maydoni va hajm nisbati.
02-rasm: Kapillyar elektroforez
Kapillyar elektroforez yuqori aniqlik talab qilinadigan sud tibbiyoti kabi holatlarda qoʻllaniladi va u qimmat texnika boʻlgani uchun tez-tez ishlatilmaydi.
Kapillyar elektroforez va jel elektroforez o'rtasidagi o'xshashliklar qanday?
- Ikkala usulda molekulalarni ajratish molekula zaryadi va hajmiga asoslanadi.
- Har ikkala usul ham nuklein kislotalarni, ham oqsillarni ajratish uchun ishlatilishi mumkin.
- Ikkala texnikaning namunaviy hajmi bir xil.
- Har ikki usulda ajratishni osonlashtirish uchun bufer ishlatiladi.
Kapilyar elektroforez va jel elektroforez o'rtasidagi farq nima?
Kapillyar elektroforez va jel elektroforez |
|
| Kapillyar elektroforez - suyuq yoki jel polimer muhiti yordamida kapillyar naychadagi biomolekulalarni ajratish usuli. | Gel elektroforezi - polimer jel muhiti yordamida vertikal yoki gorizontal tekislikda biomolekulalarni ajratuvchi usul. |
| Ajratish | |
| Kapillyar elektroforezda ajratish kapillyar naycha ichida amalga oshiriladi. | Gel elektroforezida ajratish vertikal yoki gorizontal tekislikda amalga oshiriladi. |
| Ajratish vositasi | |
| Kapillyar elektroforezda gidroksietilselüloza kabi suyuq polimerlardan foydalaniladi. | Gel elektroforezida vosita sifatida agaroz yoki poliakrilamid ishlatiladi. |
| Oʻzaro bogʻlanish | |
| Kapillyar elektroforezdan yuqori aniqlikni olish mumkin. | Jel elektroforezida ruxsat past. |
| Yuza maydoni va hajm nisbati | |
| Kapillyar elektroforezda sirt va hajm nisbati yuqori. | Gel elektroforezida sirtning hajmga nisbati past. |
| Aniqlash texnikasi | |
| Aniqlash kapillyar elektroforezda spektrofotometrik avtomatlashtirilgan detektorlar orqali amalga oshiriladi. | UV transilluminator orqali bo'yash va kuzatish jel elektroforezida aniqlash usullari sifatida amalga oshiriladi. |
Xulosa – Kapillyar elektroforez va jel elektroforez
Molekulyar diagnostika ilmiy dunyoda katta rol o'ynaydi. DNK, RNK va oqsillarni aniqlash va tozalash diagnostika jarayonlarida muhim bosqichdir. Elektroforez - bu jel elektroforezida ham, ancha rivojlangan kapillyar gel elektroforezida ham biomolekulalarni ajratib turadigan va aniqlaydigan usul. Jel elektroforezi vertikal yoki gorizontal tekislikda standart gözenek o'lchamidagi polimer jeli yordamida amalga oshiriladi, kapillyar elektroforez esa polimer suyuqlik yoki jel bilan kapillyar naychada amalga oshiriladi. Bu kapillyar elektroforez va jel elektroforez o'rtasidagi farq. Elektroforez texnikasi tugagandan so'ng, biomolekulalar hibridizatsiya yoki barmoq izlari kabi usullar orqali yuqori darajadagi ma'lumot olish uchun qayta ishlanadi.
Kapillyar elektroforez va jel elektroforezning PDF versiyasini yuklab oling
Siz ushbu maqolaning PDF-versiyasini yuklab olishingiz va iqtibos keltirgan holda oflayn maqsadlarda foydalanishingiz mumkin. Iltimos, PDF versiyasini bu yerdan yuklab oling Jel elektroforez va kapillyar elektroforez o'rtasidagi farq.
