Asosiy farq – vaqtinchalik va barqaror transfeksiya
Transfeksiya kimyoviy yoki fizik usullar yordamida eukaryotik hujayralar genlarini uzatishda ishtirok etadigan jarayondir. Transfektsiyani vaqtinchalik transfeksiya va barqaror transfeksiya deb nomlangan asosiy ikki turga bo'lish mumkin. Vaqtinchalik transfeksiya paytida qiziqish geni xost genomi bilan birlasha olmaydi va qisqa muddat davomida xost ichida vaqtincha namoyon bo'ladi, barqaror transfeksiyada esa qiziqish geni xost genomi bilan birlashadi va bir necha avlodlarda uzoq muddat saqlanib qoladi.. Bu vaqtinchalik va barqaror transfeksiya o'rtasidagi asosiy farq. Ikkala holatda ham transfeksiya muvaffaqiyatli o‘tadi va genlar ifodalanadi.
Oʻtkinchi transfeksiya nima?
Transfeksiya genlarni eukaryotik hujayralarga kiritish uchun muhim vositadir. Transfeksiyaning ikki turi orasida vaqtinchalik transfeksiya genlarni uzatishning keng tarqalgan usuli hisoblanadi. Vektor orqali begona genlar xost hujayralari ichida o'zgaradi. Chet DNK mezbon hujayraga kirgach, uning ikkita varianti bor. U xost genomi bilan birlashishi va replikatsiya qilishi yoki genomga integratsiya qilmasdan ichkarida qolishi mumkin. Vaqtinchalik transfeksiya mezbon genomiga integratsiya qilmasdan kiritilgan genlarning vaqtinchalik ifodasini namoyish etadi. Genlar hujayra bo'linguncha kodlangan oqsilni ifodalaydi va ishlab chiqaradi. Biroq, integratsiyaga qodir emasligi sababli, u takrorlanib, kelajak avlodlarga kira olmaydi. Ushbu turdagi transfeksiya qisqa vaqt ichida muvaffaqiyatli bo'ladi. Hujayra bo'linishi paytida yoki boshqa omillar tufayli begona DNK parchalanadi. Vaqtinchalik transfeksiya begona DNK yuqori o'ralgan DNK shaklida bo'lganda namoyon bo'ladi.
01-rasm: Vaqtinchalik transfeksiya
Barqaror transfeksiya nima?
Barqaror transfeksiya xorijiy genlarning xost genomiga muvaffaqiyatli integratsiyalashuvini koʻrsatadi. Xost hujayra ichiga begona DNK kirgandan so'ng, begona DNKning bir qismi xost genomi bilan birlashadi va uning bir qismiga aylanadi. Demak, begona DNK ham ko'payadi va mezbon genom replikatsiya qilinganda kelajak avlodlarga o'tadi. Ushbu turdagi transfeksiya murakkab va kam uchraydi. Biroq, genomga barqaror transfeksiya tufayli bu xususiyat bir necha avlodlar uchun uzoqroq davom etadi.
Barqaror transfeksiya qiyin jarayon boʻlib, DNKni samarali yetkazib berishni va uning genomiga begona DNKni hujayra olishini talab qiladi. Demak, chiziqli DNK dumaloq DNKga qaraganda barqaror transfeksiyani qo'llab-quvvatlaydi. Biroq barqaror transfeksiya tezligi 104 oʻzgartirilgan hujayradan taxminan bittasini tashkil qiladi. Barqaror transfeksiyani tanlash mumkin boʻlgan markerni kotransfomatsiyasi va muhitda sunʼiy tanlash orqali kuzatish mumkin.
02-rasm: Barqaror transfeksiya
Oʻtkinchi va barqaror transfeksiya oʻrtasidagi farq nima?
Oʻtkinchi va barqaror transfeksiya |
|
| Xorijiy DNK xost genomiga integratsiyalashmaydi. | Xorijiy DNK xost genomi bilan birlashadi va uning bir qismiga aylanadi. |
| Xost ichida replikatsiya | |
| Transient transfektsiyalangan genlar xost ichida replikatsiya qilmaydi. Shuning uchun genlar keyingi avlodlarga o'tmaydi. | Genlar xost ichida koʻpayadi va kelajak avlodlarga oʻtadi. |
| Gen ifodasining vaqt davomiyligi | |
| Genlar cheklangan vaqt oraligʻida ifodalanadi va shundan soʻng ular yoʻq qilinadi. | Genlar genomning bir qismiga aylanadi va avlodda uzoq vaqt davomida ifodalanadi. |
| Foydalanish | |
| Bu genlar yoki gen mahsulotlarining qisqa muddatli ifodasi ta'sirini o'rganish uchun foydalidir. | Bu gen ifodalarining uzoq muddatli ta'sirini o'rganish uchun foydalidir. |
| Transfeksiyani aniqlash | |
| Genlar ifodalangan va ularni reportyor genini kiritish orqali osongina aniqlash mumkin. | Barqaror transfeksiyani tanlash mumkin boʻlgan markerni kiritish va mediada sunʼiy tanlash orqali tanlash orqali osongina aniqlash mumkin. |
| Voqea va jarayon | |
| Oʻtkinchi transfeksiya keng tarqalgan va amalga oshirish murakkab emas. | Barqaror transfeksiya kamdan-kam uchraydi va amalga oshirish qiyin. |
| DNK tabiati | |
| Yuqori oʻta oʻralgan DNK vaqtinchalik transfeksiyaga mos keladi. | Chiziqli DNK barqaror transfeksiya uchun javob beradi. |
| Ilovalar | |
| Bu ingibitor RNKlar bilan genlarni nokdaun qilish yoki susturish, kichik miqyosda protein ishlab chiqarishni oʻrganish uchun ishlatiladi | Bu keng miqyosli, uzoq muddatli farmakologiya tadqiqotlarida, gen terapiyasida, uzoq muddatli genetik tartibga solish mexanizmlari bo'yicha tadqiqotlarda protein ishlab chiqarish uchun ishlatiladi |
Xulosa – Vaqtinchalik va barqaror transfeksiya
Oʻtkinchi va barqaror transfeksiyalar virusga asoslangan boʻlmagan tizimlar orqali eukaryotik hujayralarga gen oʻtish jarayonida namoyon boʻladigan ikki turdagi transfeksiyalardir. O'zgartirilgan xorijiy DNK vaqtinchalik transfeksiyada xost genomi bilan birlashtirilmaydi, barqaror transfeksiyada esa xost genomi bilan birlashadi. Dumaloq o'ralgan DNK vaqtinchalik transfeksiyani ko'rsatadi, chiziqli DNK esa barqaror transfeksiyani afzal ko'radi. Bu vaqtinchalik va barqaror transfeksiya o'rtasidagi farq. Biroq, vaqtinchalik transfeksiya barqaror transfeksiyaga nisbatan keng tarqalgan va osondir. Ammo ikkitadan bittasini tanlash genlarni o'tkazish maqsadi va tadqiqot loyihasining davomiyligiga bog'liq.
